Тема: Возбудители бактериальных зоонозных инфекций: чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, лептоспироза

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Научиться в готовых мазках распознавать возбудителей чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, лептоспироза.

3. Уметь ставить и учитывать результаты реакции Райта для серодиагностики бруцеллеза.

4. Изучить характер колоний антракоида на МПА в инвертированном микроскопе.

5. Изучить биопрепараты по теме занятия.

 

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Возбудитель сибирской язвы: таксономия, свойства, резистентность.

2. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы сибирской язвы.

3. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение сибирской язвы.

4. Возбудители чумы: таксономия, свойства, резистентность.

5. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы чумы.

6. Лабораторная диагностика, особенности работы с материалом от больного, профилактика и лечение чумы.

7. Возбудители туляремии: таксономия, свойства, резистентность.

8. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы туляремии.

9. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение туляремии.

10. Возбудители бруцеллеза, таксономия, свойства, резистентность.

11. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез бруцеллеза.

12. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение бруцеллеза.

13. Лептоспиры: таксономия, свойства, резистентность.

14. Факторы патогенности, патогенез лептоспироза.

15. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение лептоспироза.

16. Биопрепараты: единый бруцеллезный диагностикум, агглютинирующая бруцеллезная сыворотка, лечебная бруцеллезная вакцина, живая бруцеллезная вакцина, бруцеллин, туляремийный диагностикум, агглютинирующая туляремийная сыворотка, живая туляремийная вакцина, тулярин, живая сибиреязвенная вакцина, сибиреязвенный иммуноглобулин, противочумная вакцина.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 219-223, 231-236, 245-248, 276-279.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 125-127, 132-138, 140-143, 164-166.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка и учет развернутой реакции агглютинации Райта.

 

 

Ингредиенты	Разведения сыворотки больного
1:100	1:200	1:400	1:800	1:1600	К
Физ. раствор	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0
Сыворотка больного 1:50	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	-
Диагностикум единый бруцеллезный	По 3 капли во все пробирки
Результат
Заключение:

 

2. Микроскопия демонстрационных препаратов:

ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2

Yersinia pestis в органах Bacillus anthracisв органах

окраска метиленовым синимокраска по Граму

 

ПРЕПАРАТ №3 ПРЕПАРАТ №4

Francisella tularensisв органах Вrucella abortus в чистой культуре

окраска по Граму окраска по Граму

ПРЕПАРАТ №5

Край колонии

Bacillus anthracoides

 

ЗАНЯТИЕ №10

Тема: Возбудители заболеваний, передаваемых половым путем: сифилиса, гонореи, хламидийных уретритов

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Научиться учитывать реакцию Вассермана и ИФА для серодиагностики сифилиса.

3. Ознакомиться с морфологией изучаемых возбудителей.

4. Научиться оценивать результаты ПЦР для диагностики хламидийной инфекции.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Спирохеты: таксономия, свойства, резистентность.

2. Возбудители венерического сифилиса, факторы патогенности, патогенез, клинические формы (стадии развития) сифилиса.

3. Материал и методы диагностики сифилиса в зависимости от стадии заболевания. Профилактика и лечение сифилиса.

4. Гонококки: таксономия, свойства, резистентность,

5. Факторы патогенности и механизмы их действия. Этиологическая роль гонококков при уретритах и бленнорее. Патогенез гонореи, иммунитет.

6. Лабораторная диагностика острой и хронической гонореи. Профилактика и лечение гонореи.

7. Хламидии: таксономия, свойства, роль в урогенитальной патологии.

8. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение хламидийных уретритов.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 170-173, 266-272, 293-300.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 106-107, 160-164, 170-171.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка ИФА для серодиагностики первичного сифилиса: определение АТ класса IgМ к специфическому трепонемному антигену.

Реагенты

1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированным на внутренней поверхности лунок рекомбинантным трепонемным антигеном.

2) Исследуемые сыворотки.

3) Положительный контрольный образец сыворотки (К+), содержащий антитела к трепонемным АГ.

4) Отрицательный контрольный образец сыворотки (К–), не содержащий антитела к трепонемным АГ.

5) Конъюгат – антитела против IgМ человека, меченые пероксидазой хрена.

6) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.

7) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).

8) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.

 

Таблица. Результаты серологической диагностики первичного сифилиса методом ИФА.

 

A

K1(+)

K2(+)

B

K1(-)

K2(-)

C

D

Заключение

 

2. Демонстрация реакции Вассермана.

 

3. Микроскопия и зарисовка демонстрационных препаратов:

ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2

Treponema pallidum Chlamydia trachomatis

окраска по Романовскому-Гимзеокраска по Романовскому-Гимзе

 

ПРЕПАРАТ №3

Neisseria gonorrhoeae в гное_

окраска метиленовым синим

4. Оценка результатов ПЦР для диагностики хламидийной инфекции.

ЗАНЯТИЕ №11

Тема: Общая вирусология. Методы диагностики вирусных инфекций

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Освоить методы индикации вирусов в курином эмбрионе.

3. Уметь ставить и учитывать результаты РГА для индикации и титрования вируса.

4. Научиться осуществлять индикацию вирусов в культуре клеток по реакции гемадсорбции, цветной пробе, симпластообразованию.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Современные принципы классификации и таксономии вирусов.

2. Структура, свойства и особенности вирусов. Понятие о вирионе, вироиде.

3. Химический состав вирусов, значение различных химических компонентов. Ферменты вирусов.

4. Репродукция вирусов. Особенности репродукции РНК- и ДНК-содержащих вирусов.

5. Методы культивирования, индикация и идентификация вирусов.

6. Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 50-67.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 29-41.

 

 

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Заражение куриных эмбрионов на хорионаллантоисную оболочку, в аллантоисную и амниотическую полости.

 

2. Постановка реакции гемагглютинации для индикации и титрования вируса.

 

 

Ингредиенты разведения	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	К
Физ.раствор	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1
Аллантоисная жидкость 1:5	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	-
Взвесь эритроцитов	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1
Результат
Заключение

 

 

3. Микроскопия демонстрационных препаратов:

ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2

Симпластообразование в культуре клетокРеакция гемадсорбции в культуре клеток

 

ЗАНЯТИЕ №12

Тема: Вирусные инфекции, вызываемые ортомиксовирусами, парамиксовирусами

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Ознакомиться с методами диагностики гриппа, парагриппа, паротита, кори, аденовирусной инфекции с использованием демонстрационных реакций и микропрепаратов.

3. Знать вирусные биопрепараты для диагностики, специфической профилактики и лечения вирусных инфекций по теме занятия.

4. Научиться ставить РТГА для идентификации вируса гриппа.

 

 

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Ортомиксовирусы. Классификация и характеристика семейства. Вирусы гриппа А, В, С. Структура вириона.

2. Антигенная структура, серотипы, антигенная изменчивость (дрейф и шифт). Особенности различных серотипов вируса гриппа (H₁N₁, H₅N₁) и др.

3. Патогенез гриппа. Иммунитет.

4. Лабораторная диагностика, лечение и профилактика гриппа.

5. Парамиксовирусы. Классификация и характеристика семейства. Структура вириона.

6. Вирусы парагриппа, свойства, роль в патологии человека. Патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика, профилактика, лечение.

7. Вирус эпидемического паротита, свойства, патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика, профилактика, лечение паротита.

8. Пневмовирусы (РСВ): свойства, роль в патологии, лабораторная диагностика РСВ-инфекций.

9. Морбиливирусы: вирус кори, свойства, патогенез, лабораторная диагностика, профилактика, лечение кори.

10. Биопрепараты: живая гриппозная вакцина, диагностические противогриппозные сыворотки А(H₃N₂) и А(H₂N₂), гриппозные диагностикумы А(H₃N₂) и A(H₂N₂), иммуноглобулин против кори, живая вакцина КПК.

 

 

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 300-309.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 29-41.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка РТГА для идентификации вируса в аллантоисной жидкости.

 

Ингредиенты разведения	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	1:320	К
Физ. раствор	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1
Противогриппозная сыворотка А(Н3N2) 1:5	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	-
Противогриппозная сыворотка А(H2N2) 1:5	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	-
Аллантоисная жидкость 4ГАЕ	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1
Взвесь эритроцитов	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1
Термостат 37^оС на 2 часа
Результат А(Н2N2)
Результат А(Н3N2)
Заключение:

 

ЗАНЯТИЕ №13

Тема: Вирусные инфекции, вызываемые пикорнавирусами, аденовирусами, ротавирусами

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Ознакомиться с методами диагностики полиомиелита, Коксаки, ЕСНО, ротавирусов, аденовирусов с использованием демонстрационных реакций и микропрепаратов.

3. Изучить биопрепараты по теме занятия.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Пикорнавирусы: классификация и общая характеристика семейства, роль в патологии человека.

2. Вирусы полиомиелита: свойства, патогенез, иммунитет.

3. Лабораторная диагностика, профилактика, лечение полиомиелита.

4. Вирусы Коксаки и ЕСНО, свойства, роль в патологии человека, лабораторная диагностика, профилактика, лечение.

5. Ротавирусы: структура и свойства, патогенез, иммунитет. Лабораторная диагностика ротавирусного гастроэнтерита.

6. Аденовирусы: классификация и характеристика семейства. Аденовирусы человека, структура вириона, патогенез, иммунитет, диагностика аденовирусных инфекций.

7. Биопрепараты: живая вакцина против полиомиелита, типоспецифические полиомиелитные сыворотки, моновалентные сыворотки Коксаки и Есно.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 310-317, 318-319, 336-338.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 29-41.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка ИФА для определения антигенов ротавирусов.

 

Реагенты

1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированными на внутренней поверхности лунок антителами к ротавирусным антигенам.

2) Исследуемый материал (копрофильтрат).

3) Положительный контрольный образец (К+), содержащий ротавирусные антигены, инактивированный.

4) Отрицательный контрольный образец (К–), не содержащий специфические антигены.

5) Кроличьи поликлональные антитела к ротавирусным антигенам.

6) Конъюгат – антитела против глобулинов кролика, меченые пероксидазой хрена.

7) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.

8) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).

9) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.

Таблица. Результаты иммуноферментного анализа определения ротавирусных АГ в копрофильтрате.

 

A

K1(+)

K2(+)

B

K1(-)

K2(-)

C

D

Заключение

 

2. Индикация и идентификация вируса полиомиелита по цветной реакции и по нейтрализации цветной реакции (демонстрация).

 

3. Зарисовка препарата с внутриядерными включениями в культуре клеток

 

ПРЕПАРАТ №1

Внутриядерные включения

при аденовирусной инфекции

 

ЗАНЯТИЕ №14