Определение глюкозы в крови по цветной реакции с орто-толуидином.

Принцип метода. Белки крови осаждаются трихлоруксусной кислотой и отделяются центрифугированием. Центрифугат обрабатывается орто-толуидиновым реактивом.

 Глюкоза при нагревании с о-толуидином в кислой среде дает зеленое окрашивание, интенсивность которого прямо пропорциональна концентрации глюкозы в крови и определяется колориметрически на ФЭКе.

Расчет произвести по калибровочному графику или с применением стандартного раствора глюкозы.

Качественное определение глюкозы в моче

В норме в моче содержится незначительное количество глюкозы и она не обнаруживается обычными реакциями.

При сахарном диабете и некоторых других заболеваниях, а также после обильного приема с пищей углеводов, эмоционального стресса, при отравлениях эфиром, поражения почек он в значительных количествах появляется в моче.

Качественное определение сахара в моче с помощью реактива Фелинга

реактив Фелинга - кирпично-красное окрашивание

Количественное определение при помощи индикаторной бумаги «Глюкотест»

Качественное определение кетоновых тел в моче

В нормальной моче кетоновые тела (ацетон, ацетоуксусная и b-гидроксимасляная кислоты) содержатся в небольших количествах и обычными качественными реакциями не обнаруживаются. Повышенная экскреция их с мочой (кетонурия) наблюдается при сахарном диабете, голодании, инфекционных заболеваниях (туберкулезе и др.)

Проба с нитропруссидом натрия (Легаля) на ацетон

При взаимодействии ацетона с нитропруссидом натрия в щелочной среде появляется оранжево-красное окрашивание. После подкисления концентрированной уксусной кислотой оранжево-красное окрашивание переходит в вишневое.

Проба Либена на ацетон

Проба основана на образовании йодоформа СНI₃ при взаимодействии ацетона с I₂ в щелочной среде.

При наличии ацетона - специфический «больничный» запах.

СНз-С-СН₃ + 2I₂ + 4NаОН —®СНI₃ + CH₃COONa + 3NaI + 3Н₂О

    êê

    О

В мочу добавить  раствора FеСl₃. Наблюдается вишнево-красное окрашивание за счет комплексного соединения железа с ацетоуксусной кислоты

СНз-С-СН₂СООН —® СН₃-С-СН₃ + СО₂

   êê                               êê

 О                                О

В больницу доставлен 2-летний ребенок, по словам матери, он страдает частыми рвотами после приема пищи, отстает в весе, физическом развитии, волосы темные, но попадаются седые пряди, проба мочи после добавления хлорида железа приобрела зеленый цвет, в моче в больших количествах содержится фениллактат. Какова причина заболевания, предложите лечение.

ОТВЕТ: Заболевание - фенилкетонурия.

Причина - нарушен обмен ароматических АК (энзимопатия), накапливается фенилкетокислота- фениллактат, оказывает токсическое действие на организм, оставание в физическом и умственном развитии

Нарушение фермента- гидроксилазы, накапление фениллактата которое оказывает такое действие

Качественное определение патологического компонента- проба с с хлоридом железа- зеленое окрашивание

Лечение специфическая диета-исключение фенилаланина из пищи - диета