Демонстрация аспирационного метода

Для исследования этим способом пользуются аппа­ратом Кротова. Воздух в количестве 50-100 л пропус­кают со скоростью 25 л в минуту над открытой чашкой Петри с МПА. Открытую чашку с питательной средой устанавливают на вращающийся столик. Воздух посту­пает через клиновидную щель и с силой ударяется о поверхность питательной среды, на которой фиксиру­ются микробы. По истечении заданного времени чашку с посевом воздуха снимают, закрывают и помещают в термостат при температуре 37 °С на 24 часа.

Допустим, на чашке при подсчете обнаружено 200 колоний, воздух пропускали 2 минуты со скоростью 25 л в мин. Всего пропущено 50 л воздуха. Число микро­бов в 1 м воздуха равно

 

Демонстрация определения коли-титра воды мето­дом мембранных фильтров

Для определения коли-титра используют нитроцеллюлозные фильтры, которые бывают 5 номеров. Для исследования воды используют фильтр № 3. Через него фильтруют 500 мл воды в течение 2,5 минут. Затем фильтр переносят стерильным пинцетом на чашку со средой Эндо (на чашку можно поместить 4 фильтра).

Через сутки инкубации в термостате при 37 °С на пленке появляются типичные красные колонии Е. coli. Делают мазок. В случае обнаружения грамнегативных палочек оставшуюся часть колонии пересевают в глюкозо-пептонную среду и инкубируют при 43 °С. При положительной бродильной пробе присутствие кишеч­ной палочки считается доказанным. Например, если на фильтре образовалось 4 колонии Е. coli, так как фильт­ровали 500 мл воды, то в 1 л будет 4x2=8 бактерий. Ес­ли коли-индекс равен 8, то коли-титр равен 1000:8=125.

Демонстрация определения коли-титра воды по ме­тоду Эйкмана (двухфазно-бродильный метод)

Общий объем исследуемой воды 333 мл. Исследо­вание проводится на глюкозопептонной среде Эйкмана (вода, пептон, глюкоза). Концентрированная среда Эйкмана заливается в три флакона по 100 мл в каждый, в 3 пробирки по 1 мл и в 3 пробирки по 10 мл. Иссле­дуемая вода засевается во флаконы по 100 мл, в первые 3 пробирки по 10 мл, в последующие 3 по 1 мл воды. Таким образом, в 9 емкостей засевается 333 мл воды. Посевы помещают в термостат на сутки. Далее из всех емкостей делаются высевы на среду Эндо. Для этого чашку со средой Эндо делят на 9 секторов. В за­висимости от количества пробирок и флаконов, давших рост кишечной палочке на среде Эндо (красные коло­нии), цифровое значение коли-титра находят по специ­альной таблице.

 

 

Т ема:    «Нормальная микрофлора организма человека»

Цель:

         – научиться методам определения микрофлоры организма человека.

 

Задачи:

         – усвоить значение нормальной микрофлоры в жизнедеятельности

             человека;

- овладеть методами определения микрофлоры различных органов

и полостей организма человека;

- уметь оценить полученные результаты.

Микрофлора тела человека

 

Все поверхности и полости тела человека, соприкасающие­ся с внешней средой, заселены микроорганизмами.

Микрофлору организма делят на 2 группы: облигатную (постоянную) и случайную (факультативную, транзиторную). К облигатной группе относятся микроорганизмы, максималь­но приспособленные к существованию в организме хозяина. Они представлены сапрофитами и условно-патогенными ви­дами.

Факультативная микрофлора является временной и не­обязательной. Ее присутствие определяется поступлением микробов из окружающей среды и состоянием иммунное сис­темы организма хозяина. В состав транзиторной микрофлоры также входят сапрофитные и условно-патогенные микроорга­низмы.

Каждому органу человеческого организма, сообщающемуся с внешней средой, соответствует определенная микрофлора.

 

Микрофлора кожи

 

Наиболее часто обнаруживаются непатогенные бактерии: стафилококки (Staphylococcus epidermidis, Staph. saprophyticus), стрептококки (Streptococcus), коринебактерии (Соrynebacterium xerosis), спорообразующие бациллы (Bacillus subtilis), микобактерии (Micobacterium), а также дрожжеподобные грибы (Candida albicans). Примерно в 5% случаев на коже встречается патогенный стафилококк (Staphylococcus aureus).

 

Микрофлора уха

 

Во внутреннем ухе в норме не содержится микробов. В наружном слуховом проходе обнаруживается факультатив­ная микрофлора, содержатся непатогенные стафилококки (Staph. epidermidis, Staph. saprophyticus) и коринебактерии (Corynebacterium), реже встречаются бактерии рода Pseudomonas, дрожжеподобные грибы (Candida albicans) и плесневые грибы (Aspergillus).

Микрофлора конъюнктивы

 

В состав микрофлоры конъюнктивы входят стафилококки                     (S. epidermidis, S. saprophyticus) и коринебактерии (Соrynebacteium). В отдельных случаях - микоплазмы, адено- и герпесвирусы; в 5% случаев выделяют S. aureus.