Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Определение активности антибиотиков методом диффузии в агар
Этот метод точнее, чем метод серийных разведе- ний, поэтому его чаще используют на практике. Однако методу диффузии присущи определенные недостатки. Критерии для оценки данных, полученных с быстро- растущими микроорганизмами, не применимы к мед- леннорастущим штаммам. Поэтому если в качестве тест-культуры необходимо использовать медленнора- стущий микроорганизм, применяют метод разведений или условия испытания отрабатывают в специальных экспериментах. То же можно сказать и о медленно- диффундирующих антибиотиках. В чашки Петри разливают питательный агар, смешанный с тест-культурой. Количество послед- ней берут из расчета 20 млн. клеток на 1 мл среды. После застывания агара на его поверхность наносят цилиндры, в которые вносят по 0,1 мл испытуемого раствора антибиотика параллельно со стандартным раствором. Вместо цилиндров можно использовать лунки, которые делают в агаре с помощью специаль- ного приспособления. После этого чашки помещают в термостат при 37°C на 16-18 часов. По истечении этого времени измеряют размеры зон задержки роста тест-микроба. Расчет активности антибиотика по размеру зон за- держки может быть произведен на основании расчет- ных таблиц В. С. Дмитриевой (ГФ) или по стандарт- ным кривым. Определение чувствительности микробов к ан- тибиотикам методом дисков проводят прежде всего для оценки эффективности антибиотиков в клиниче- ских условиях. Клинический материал или микроб- ную культуру, выделенную от больного, засевают на поверхность питательного агара сплошным газо- ном, накладывают бумажные диски, пропитанные раствором антибиотика (используют коммерческие образцы, содержащие определенные концентрации). После инкубации при 37°C в течение времени, необ- ходимого для роста выделенного возбудителя, опре- деляют диаметр зоны торможения роста. Полученные величины сравнивают с размерами зон задержки ро- ста, указанными в инструкциях, прилагаемых к дис- кам, после чего выделенные микроорганизмы отно- сят к чувствительным, умеренно чувствительным или резистентным. Прежде чем предложить к реализации любой антимикробный препарат, производитель обя- зан определить спектр его активности по отноше- нию к тысячам штаммов различных микроорганиз- мов, учитывая, что фармакокинетические свойства соединения должны поддерживать концентрации в сыворотке, в 2-4 раза превышающие минимальную ингибирующую концентрацию. При выделении кон- кретных возбудителей используют определенные на- боры дисков (табл. 25).
Ферментные методы 13.4.1 Ускоренный метод определения чувствительности микроорганизма К антибиотику В чашку Петри наливают 15 мл питательного ага- ра. После застывания агара на него наносят смесь 4 мл такого же агара, 1 мл взвеси тест-культуры, приготов- ленной по стандарту 1 млрд. клеток в 1 мл, и 1 мл 0,2% водного раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола (pH 7,2-7,3). Вместо тест-культуры можно использовать клинический материал. Затем на застывший агар яр- косинего цвета наносят диски, пропитанные антибио- тиками, и чашки ставят в термостат при 37°C. Через 2-4 часа учитывают результаты по диаметру синих зон отсутствия роста. Резистентные к антибиотику микро- бы восстанавливают краситель, обесцвечивая его или трансформируя в желтый цвет. Данный краситель задерживает рост стафило- кокков, поэтому при работе с этим микроорганизмом раствор индикатора наливают на поверхность чашки в количестве 2-3 мл уже после выдерживания чашки с дисками в термостате. Избыток индикатора сливают через 5-7 мин. и учитывают результаты.
Наборы дисков для определения чувствительности некоторых микроорганизмов Таблица 25. Бактерии Диски с XTB
|
||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2021-04-05; просмотров: 135; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.142.196.223 (0.006 с.) |