Предмет и задача молекулярной биологии, её значение для практики. История развития молекулярной биологии.

ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ И ОСОБЕННОСТИ МОЛЕКУЛЯРНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ЖИВЫХ СИСТЕМ. ЖИЗНЬ. ОСНОВНЫЕ ПРИЗНАКИ ЖИВОГО.

Жизнь -это способ существов-я открытых саморегулирующихся и самообр-ся систем на основе биохим. взаимод. белков, НК, АК и др. соединений и преобразования поступающих из внешней среды в-в и мол-л.

Основн. признаки жив.сист:

· Обмен в-в и Е с окруж.сред

· Рост

· Размножение

· Раздражимость

· Изменчивость

Каждый из признаков в отдельности может быть присущ и нежив. сист. Живые сист. облад. всеми признаками в совокупности.

Наименьшая единица – клетка.

Общие принципы организации живых систем.

1. Большинство хим. комп-ов жив.сист. представл. собой орг соед-я,(т.е соед. С в которых атомы связываются др.с др., а так же с H,O, N). С, О, Н,N- более 90% массы жив.сист.

2. Орг. соед. Вход-ие в состав жив. сист. Разнообразны. Наибольшим разнообразием отлич белки и НК.

(Пр-р: киш палочка насчитыв 5000 различ орг соед-ий, из них 3000-белков, 1000-НК, 1000- др орг соед-я. У ч-ка 50.000 разновидностей белков).

3. Разнообр. органич. соед. построены из большого колич-ва мономеров (Пр-р в сост. белков -20 различ.АК). Их различ. комбинации дают неограниченное число вариаций белков, НК.

4. Идентичность каждого вида и каждой особи сохран. благодаря наличию свойственных только им наборов белков и НК.

5. Все биомол-лы в кл-е выполн спецефич.ф-ции.

6. Живые орг-мы создают и поддерж. присущую им упорядочность за счет Е, поступающей из внеш.сред. при этом степень упорядоченности внеш.сред.уменьш (энтропия растет).

7. Живые орг-мы как преобраз-ли Е подчиняются законам термодинамики.

 

 

I закон сохран. и превращ. Е.- Е не куда не исчезает, не возник.заново, она может первращ. из одного вида в другую.

II закон теплота не может самопроизвольно передаваться от более холодного к более теплому.

Особенности жив.систем как преобразователей Е

1. Построены из сравнительно хрупких мол-л, не способных выдерж. высокую t, p, pH.

2. Не могут использ. тепло как источник Е и функционируют при постоянной t.

3. Для осущ. жизнедеят. использ. хим. Е

4. При образовании Е ключевую роль играют ф-ты, котор. выступают в качестве катализаторов хим.р-ции и сниж. их энергию активации.

5. Энергетические потребности всех жив.орг. прямо или косвенно удовлетв-ся. солнечной Е.

СТРОЕНИЕ ДНК. МОДЕЛЬ УОТСОНА-КРИКА

ДНК - гетерополимер, мономерами, кот. явл. нуклеотиды. Полимеры – в-ва молекулы кот. сост. из повторяющихся, одинаковых или сходных струк-х ед. (000000-полимер, 0-стр-я ед. мономер).

Биополимеры: гомополимер (из одинак. мономер крахмал, целлюлоза); гетерополимер (из разных мономер).

В состав ДНК входит 4 нуклеотида: А,Г (пуриновые нукл.); Ц,Т (пиримидиновые нукл.)

Разл. нуклеотиды отлич. друг от друга только различ. строением азотистого основания.

Полусхематич. строения нукл.

1) пуриновые АзотОснов - производные пурина

2) Пиримидиновые АО – производные пиримидина

Нуклеотиды способны соед. др. с др. при помощи фосфодиэфирных связей и образ-ть полинукл. цепочки.

Правило Чаргаффа.

1.Суммарное кол-во пуриновых нукл. ДНК суммарному кол-ву пиримидиновых SА+Г=SТ+Ц

2.Количество А=Т, а кол-во Г=Ц.

Формы ДНК

В –форма хар-на для живых систем ин виво. правозакручена

А – форма образ-ся при транскрипции, один виток 11 п.н.

С – форма, один виток – 9 п.н. правозакручена

Z – левозакручена. Получена искусственно при высокой концентрации солей.

По А

образ. набор фрагментов

³²Р – 1 нуклеотид

³²Р АГЦТ – 5 нуклеотидов

³²Р АГЦТАГТЦТ– 10 нуклеотидов

По Г

образ. набор фрагментов

³²Р А – 2 нуклеотида

³²Р АГЦТА – 6 нуклеотидов

³²Р АГЦТАГТЦТА–11 нуклеотидов

 

По Т

образ. набор фрагментов

³²Р АГЦ – 4 нуклеотида

³²Р АГЦТАГ – 7 нуклеотидов

³²Р АГЦТАГТЦ–9 нуклеотидов

 

 

По Ц

образ. набор фрагментов

³²Р АГ – 3 нуклеотида

³²Р АГЦТАГТ – 8 нуклеотидов

³²Р АГЦТАГТЦТАГ –12 нуклеотидов

калибровочная дорожка, отраж. число нуклеотидов

Чтение электрофолаграмы осущ. от + к - (снизу вверх).

+ соответствует 5’-концу фрагмента ДНК.

5’ АГЦТАГТЦТАГЦ 3’

 

Метод Сенгера (ферментативный метод)

Метод основан на остановке ферментативного синтеза ДНК при помощи дидезоксинуклеотидов (gg)

 

Ген – ед-ца функции.

2) Ген мутирует как единое целое и представляет собой единицу наследственной изменчивости.

Ген – ед. Мутации.

3) Ген занимает опр участок локус на хромосоме и явл предельной единицей рекомбинации и не разделим далее посредствам кроссинговера.

Ген (по Моргану) ‒ мельчайшая, далее неделимая единица наследственности, представляющая собой ед ф-и, мутации, рекомбинации.

В 50 годы 20 века начали накапливаться данные о делимости гена. Возник вопрос о том, каковы пределы делимости гена. Ответ на этот вопрос был получен в работах с. Бензера выполненных на бактериофаге Т₄. Жизненный цикл бактериофага!

У фага Т₄ имеется условно-летальная мутация.

r2 (от англ rapid-lisis – быстрый лизис).

Фаги выращиваются на бактериальном газоне.

r2 условно летальная мутация – мутация r2:

- не растут на E.Coli, штамм К₁₂;

- растут на E.Coli, штамм В.

Этапы работы Бензера по изучению тонкой структуры гена:

1) Получение большого кол-ва независимых мутаций по гену r2⁺ (r2⁺→ r2). Около 2 тыс независимых мутаций.

2) Проведение для этих мутаций функц-ого теста на аллелизм (цис-транс-тест), путем совместного заражения различ-ми мутантами культурами E.Coli, К_12.

Имеется рост фага на E.Coli, на К₁₂ произошла комплементация, в результате чего фенотипически проявляется r2⁺.

Если отсутствует рост – комплементация отсутствует.

* - мутация.

В результ этого этапа было установлено, что ген r2⁺ имеет 2-е группы комплементации.

 

Вывод: Ген не явл единицей ф-й, единицей ф-й явл часть гена, котор получ название – цистрон.

Цистрон – функциональная часть гена, в пределах котор выполняется цис-транс-тест, явл единицей ф-й.

Ген – кодирует белок.

Цистрон – кодирует 1 ППЦ. Белок кодируется 4 цистонами.

 

3) Рекомбинационное картирование мутации.

Рекомбинация – обмен участками между молекулами ДНК.

Также осуществляется путем совместного заражения E.Coli различными мутантами относящихся к одному цистрону r2А или r2В. Частота рекомбинации явл мерой расстояния между точкой мутации.

rf (от латинского recombination fregyency);

rf= * 100

Минимальная частота рекомбинации – 0,02%;

Общая длина рекомб карты (фага) – 1500%;

Общее число фагов нуклеотидов (Т₄) -1,8 * 10⁵;

Единица рекомбинации = *1,8 * 10⁵ = 2,34 нуклеотида;

 

 

Вывод: Единица рекомбинации =2 нуклеотида и она получ название 1 рекон.

РЕАЛИЗАЦИЯ ГЕН-Й ИНФ-И (ГИ) И ЕЕ ПРОСТРАНСТВЕННЫЕ ОСОБЕННОСТИ У ПРО- И ЭУКАРИОТ. ЦЕНТРАЛЬНАЯ ДОГМА (ЦД) В МБ.

Реализация ГИ – перенос информации о первичной стр-ре белка от мол-л ДНК через ряд промежуточных этапов к синтезированным белковым молекулам.

Впервые путь такого переноса был установлен в 1958г. Ф Криком. Он выражается в виде схемы: ДНК à РНКà Белок

Данная схема получила название ЦД молекулярной биологии.

Формулировка «ЦД»: перенос генетической информации в живых системах осуществляется в одном направлении, а именно от ДНК к РНК, а затем к белку.

Эволюция представлений о путях переноса генетической информации:

1) Схема Ф. Крика ДНКà РНК à Белок

2) Схема отражающая основные матричные процессы:

3) Современная схема:

Схема циклов роботы рибосом

Этапы элонгации:

1. Реак-ия транскриптидирования – перебрасыв-ие п.п.ц с тРНК₁ на тРНК₂, бораз-ие пептидной связи.

2. Раек-ия транслокации – перемещ-ие рибосомы вдоль мол-лы иРНК на 1 кадон вправо, переход пептидил тРНК из А центра в Р центр, поступл-ие в А центр нового кадона, освобож-ие тРНК₁.

3. Присоединение новой аминоацил тРНК к А центру рибосомы – поступ-ие в А центр рибосомы новой аминоацил тРНК(3), в соответ-ии с принципом компл-ти кадон – антикадон.

В элонгации принисают участие белковые факторы элонгации без кот. не происходит ее действие (у прокариот: EF – Tu, EF – Ts. EF – G. у эукариот: EF₁, EF₂).
Терминация – окончание трансл-ии, отсоед-ие рибосом от мол. иРНК, освобож-ие синтез-ой белковой мол-лы. Сигналом терминации служат терминир-ие кадоны: УАГ, УГА, УАА. В терминации участ-ют белковые факторы терминации: RF₁,RF₂,RF₃.

Процессинг синтезир-ой белковой мол-лы – процесс ее созревания. Он включает след-ие этапы:

- модификация N и C концов – отсоединение некот-го колич-ва АК.
- удаление сигнальных после-ей (15-20 N-концевых АК).
- добавление простетических групп (для сложных белков).

- обр-ие дисульфидных мостиков, препят-их денатурации
- холдинг – формир-ие сложной простр-ой стр-ры белковой мол-лы.

 

МГЭ прокариот

Началу изуч. МГЭ положило открытие в конце 60-х г., необычных мутантов по, общими для этих мутантов были вставки стр-ах, кот приводили к мутациям и были названы Ys – элем-ты.

YS – элем-ты обл-ют способ-ю менять свое местоположение на хр-ме, т.е. явл. МГЭ.

Им-ся 2 разнов-ти:

1) Ys-элем-ты - их размеры =200-5700 п.н. он хар-ся след особенностями:

· На концах несут несовершенные повторы (палиндромы), длиной от нескольких пар до неск. десятков пар нуклеотидов.

· Содержат ген кодирующий синтез транспозаза, отвеч. за перемещ. Ys-ов.

· При встраивании в др. уч-ки хр-м небольшие дупликации длина 5-11 п.н. (флакирующие Ys-эл-ты).

Бакт. Хр. E.Coli несет только Ys-ов в кл перемещ с частотой 10^-6-10^-8 на клет деление.

2) Tn – элементы (транспозоны) харак. теми же особ., что и Ys кроме гена кодир. транпозазу, они могут переносить гены устойч-ые к антибиотикам. Эти гены могут расп-ся как внутри Tn так и между 2-мя Tn-эле-ми.

 

 

 

МГЭ эукариот

Транспозоны

Пример: - Ac, Ds у кукурузы,

-P- эле-ы у дрозофилы

По краям не несут инвентир. повторы, а в центр. част. ген, кодир. синтез фер-та транспозаза.

В 1976 г. Гвоздев, Георгиев открыли МГЭ у дрозофилы, кот получили назв Мобильные Дисперсированные Гены (МДГ).

МДГ случайно распред. по всему геному и способ. переем-ся с частотой 1*10^-5 – 10^-8 на поколение.

В наст. Время у дрозофилы открыто множество МГЭ кот. Названы терминами обозн. Склонности к переем.:

Hobo – бродяга,

flea – блоха,

магелан

бигль

Ретротранспозоны

Получ. Такое название потому что в их перемещ приним. участие обратная транскрипция (ретро-обратный). Широко распространены у млекоп. сост. более 10% от всей ДНК

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ РЕКОМБИНАЦИЯ

Г.Р. - совок. процессов приводящ. к перераспред. нукл. послед-й и в геномах. Явление г.р. было открыто в 1910 г. Т. Морганом на дрозофиле. В частности им был установлен обмен уч-ми между гомолог. хр-ми получ. назв. – кроссинговер ( один из частных случаев рекомбинации).

К Г.Р. след. процессы:

-обмен уч-ми между молек. ДНК (или РНК)

-встраивание уч-в ДНК в опред. места на молек-х ДНК.

-комбинирование хр-м при формировании гамет и спор

-кроссинговер – обмен уч-ми между гомолог. хр-ми

В настоящее время Г.Р. подразд на 2 класса:

1) общая

2) сайт-специфическая(«незаконная»)

1. Общая: протекает на основе гомологии рекомбин. уч-в ДНК

2. «незаконная»: для ее осущ. гомологии реком. уч-в

Общая рекомбинация

Наиболее изученным процессом отн. к общей рекомб. явл. кроссинговер, кот. происх. в профазе мейоза1 у эу-.

На этой стадии хр-м сост из 2-х хроматид в обмене уч-т 2 хроматиды из 4, каждая из хроматид содер. 1 мол. ДНК.

Молек. мех-м общей рекомбинации на примере кроссинговера

В рекомб. уч-т 2 мол-лы ДНК и следующие осн-е белки: -Rec BCD, - Rec A, -SSB

 

Осн. этапы рекомбинации:

1) Присоед. RecBCD к одной из мол-л ДНК, частич. расплетение 2-ой спирали.

2) Перемещение RecBCD-белка вдоль мол-лы ДНК, поиск сайта рекомбинации (v=300 нукл./сек). Образование разрыва (1-но нитевого) в 1-й из молек-л ДНК эндонуклеаза, т.о. Rec BCD белок действ. одновременно как и геликаза и эндонуклеаза.

3) Удерживание расплетенного уч-ка ДНК в одноцепочечном состоянии (SSB-белки), образ. Т.наз. «уса» перебрасывание «уса» на соседнюю мол-лу, частичное расплет. 2-й спирали, взаимодействие 2-х путей ДНК принад-т разным молек. по принципу комплементарности.

Данный этап осущ при участии Rec A-белка

4) Образ. 1-нонитевого разрыва в другой мол-ле (Rec-BCD) формирование гетеродуплекса, уч-ов мол-й гетерозиготности и полухиазм.

Полухиазма (стр-ра Холлидея) - место пересеч-я нитей ДНК, принадл-х различ-м мол-м.

Уч-ки мол-й гетерозиготности – уч-ки в них одна нить принадл. 1 мол-ле ДНК, а др. др-й.

5) Образ. 2-го однонитевого разрыва в области полухиазм.

6) коррекция уч-в (сайтов) мол-й гетерозиготности:

А) 1→2,4 →3;

В) 2→3,3→4;

С)2→1, 4→3.

Коррекция – приведение нукл. состава 1 нити в соотв. с нукл. составом другой.

Нереципропный обмен (конверсия генов) – данный мех-м общей рекомбинации был установлен в 1961 г Австралиским ученым Холидеем.

Признаки бактерий:

1.Морфологические признаки - форма, окраска, размеры колоний, образуемых бактериальными кл-ми

2. Биохимические признаки – способность (+) или неспос-ть (-) синтезировать определенные в-ва (АК, витамины), а также использ определенные в-ва в кач-ве источника Е (глюкоза, фруктоза, галактоза и др.)

Met+ - синтез метионина, met- - неспособность синтезир метионин.

Мутанты, не способные синтезировать или усваивать определен в-ва – ауксотрофные мутанты.

Признаки устойчивости

К температуре t (R – устойчивы, S – чувствительны).

К антибиотикам

Основные методы работы с б-ями:

Метод разведения

1мл культуры + 9мл среды => в 10 раз => 1мл + 9 мл => в 100 раз и т.д.

4. Метод селективных пит сред

Селективные пит среды – минимальн пит среда с добавлением в нее 1го определенного в-ва (АК, витамины). Используется для выявления ауксотрофных мутантов.

Селективн пит среды: (-)min + met; (-) min + lus (лизин); (+) min + trp (триптофан). Вывод: мутант не способен синтезировать триптофан.

Метод отпечатывания

К полной питательной среде прикасаются специальным цилиндром, покрытым бархатной материей, и затем касаются чистой среды. Сохраняется «рисунок» колоний.

29. СПОСОБЫ ПЕРЕНОСА ГЕН.ИНФОРМАЦИИ У БАКТЕРИЙ. ТРАНСФОРМАЦИЯ,МЕХАНИЗМ, ЗНАЧЕНИЕ.

3 осн. способа переноса ген-й инф-ии от одних кл-к к другим:

1. трансформация (при пом.изолир-й ДНК).

2. Коньюгация (путем непосредственного контакта между бакт-ми кл-ми). 3. Трансдукция (при пом бактериофагов.
Общая схема переноса ген.инф-ии.

1 – проникновение ДНК донора в кл-у реципиента

2 – встраивание ДНК донора в бактер хромосому реципиента путем незаконной рекомбинации.
1. ТРАНСФОРМАЦИЯ

схема опыта Гриффитса. s(гладкий)-вирулентные, R(шероховатый) невирулентные(мутанты)
в орг-м мыши вводят пневмок инфекцию(S), она погибает. после термообработки S становятся также невирулентными, мыши от St не погибают. Но если мышей инфицировать смесью R и S, то животные погибают от пневмок.инфекции. В легких этих мышей обнаружен штамм S вирулентных клеток. ВЫВОД: произошла передача признаков вирулентности и формы калоний от убитых нагреванием бактерий шт.S, живым бактериям шт.R. Данное явление называется ТРАНСФОРМАЦИЕЙ.

Схема эксп-та Эвери.
шт.S(вир.) и шт.R(не вир). шт.S убивался высокой t, из клеток мертвого шт.St выделяли днк и смешивали со шт.R, этой смесью инфицировали мышей, в следствии чего они погибали.

ВЫВОД:днк является носителем ген-й инф-ии, отвечает за передачу признаков от бактерий шт S к бакт шт.R.

МОЛЕК-Й МЕХ-М ТРАНСФ-ИИ. для осущ-я трансф-ии кл-ки рец-ента должны нах-ся в сост-ии компетентности, кот.они приобретают в лаг-фазе роста.
ЭТАПЫ ТРАНСФ-ИИ. 1. связывание днк донора с компетентными кл-ми. 2. разрезание днк донора на фр-ты с пом. ферментов, выделяемых реципиентом. 3. проникновение фрагм-в днк в пространство между клет.оболочкой и ЦПМ. превращение двухцеп-х в одноцепочечные. 4. прон-ние в кл-ку фр-та одноцеп-ой днк. 5. интеграция одноцеп-го фр-та днк в бакт.хромосому путем сайт-специф-й рекомбинации. 6. коррекция сайтов молекулярной гетерозиготности.

ЗНАЧЕНИЕ ТРАНСФ-ИИ: является одним из осн-х способов переноса генов в кл-ки реципиента в генной инженерии.

 

Схема метода

На основе таких опытов строятся генетические карты бактерий.

Особенности ген.карты: Имеет кольцевую форму;

Меры расстояния между генами является время конъюгации в мин.

Общий вид генетической карты бактерий:

Общая длинна ген.карты E.Coli 111 мин.

 

 

 

ПРЕДМЕТ И ЗАДАЧА МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ, ЕЁ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ПРАКТИКИ. ИСТОРИЯ РАЗВИТИЯ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ.

МБ – молодая наука, возникшая на стыке биохимии, биофизики, цитологии, генетики и ряда других биологических наук.

ДР – 1938 год. Термин молекулярная биология предложен английским учёным Уивероном.

Предмет – структура и функционирование важнейших биологических макромолекул: ДНК, РНК, белков

Задачи – изучает:

- строение и физико-химическое свойство белков и нуклеиновых кислот

- процессы репликации, репарации, рекомбинации молекулы ДНК

- принцип и механизмы кодирования информации о синтезе белков на молекулах ДНК и РНК

- структура геномов различных организмов от вирусов до млекопитающих

- молекулярные механизмы реализации наследственной информации (транскрипция, процессинг, трансляция)

- мобильные генетические элементы

- строение и функционирование клеточных мембран

- молекулярные механизмы старения и гибели клеток

Значение МБ для практики:

Явл. теоретической основой генной и клеточной инженерии играет важную роль в развитии биотехнологии.

Основные направления практического применяются учеными:

1. Биотехнологическое производство различ в-в.

2. Молекулярные подходы в медицине:

· Генная терапия (замена дефектных генов на норм)

· Диагностика лечения раковых заболеваний

· Трансплантология

· Культура тканей и органов

· Молекулярные механизмы старения.

·

3. С/Х-ые:

· Получение трансгенных сортов растений и пород животных

· Микроклональное размножение разных видов растений.

История развития МБ:

История изучения ДНК и РНК

1868 – Фридрих Мишер впервые выделил ДНК из ядер погибших лейкоцитов.

1934 – А.Н.Белоозерский впервые выделил ДНК из кл-ок растений.

1934 – Кольцов в своих работах закладывает основы МБ как науки.

Основные идеи Кольцова:

1. Матричный принцип репродукции биол-х макромол-л

2. Гипотеза молекулярного строения хромосом

3. Двух нитчатая стр-ра мол-л наследственности

4. Тезис «omnis molecula ex molecula» - каждая молекула из молекул.

Предшественники зарождения молекулярной биологии:

Н.К. Кольцов и Н.В. Тимофеев-Ресовский.

1935 год – Н.В. Тимофеев-Ресовский опубликовал статью «о природе генных мутаций и молекулярной структуре гена».

1944 год – Э. Шредингер опубликовал работу «Что такое жизнь с точки зрения физики».

1889 год – Альтман предложил термин «нуклеиновые кислоты».

1881 год – Кёссель показал, что в состав НК входит азотистые основания, сахар рибоза/дезоксирибоза и остаток фосфорной кислоты.

1944 год – О. Эвери с сотрудниками впервые доказал, что именно ДНК является носителем генетической информации клетки.

1948 год – Р. Вендерли установил постоянство содержания ДНК в гаплоидном наборе хромосомного вида

1949-51 гг. – Э. Чаргафф устанавливает количественную закономерность – правило Чаргаффа

1952 год – М. Уилкинс и Р. Фронклин впервые провели рентгеноструктурный анализ кристаллов ДНК и показали её спиральную структуру.

1953 год – Дж. Уотсон, Ф. Крик разработали модель строения ДНК – двойная спираль, которая основывалась на правилах Чаргаффа и данных рентгенных анализов.

1962 год – Уотсон, Крик, Уилкинс удостоены Нобелевской премии за открытие структуры ДНК.

1954 год – Г. Гамов – впервые выделил концепцию генетического кода.

1954 год – Г. Стент – предложил 3 модели репликации ДНК – консервативная, полуконсервативная и дисперсную.

1956 год – А. Конберг – впервые открыл и выделил фермент ДНК-полимераза.

1956 год – Ф. Крик предсказал необходимость адаптерной/транспортной РНК.

1961 год – Ф. Крик формулирует центральную догму молекулярной биологии (ДНК -> РНК -> белок).

1961 год – Гро и Шпингельман открыли и-РНК, которая выступает в качестве посредника.

1961 год – Ф. Жакоб и Ж. Моно предложили модель Оперона.

1965 год – Р. Холли впервые поясняет структуру т-РНК.

1969 год – Арвер открывает явление рестрикции – модификации бактерий молекулами рестриктазами.

1970 год – Г. Корана впервые осуществляет искусственный химический синтез гена.

1972 год – Темин и Балтимор открывают явление обратной транскрипции у РНК-содержащих вирусов.

1972 год – П. Берг с сотрудниками конструируют первую рекомбинантную молекулу ДНК – дата рождения генной инженерии.

1973 год – А. Максан и У. Гилберт разрабатывают химический метод определение последовательности ДНК – сиквенирование

1977 год – Ф. Сенвер разрабатывает ферментативный метод сиквенирования.

50-70 -е годы – «Золотой век» МБ

1984 год – Мюллис разрабатывает метод ПЦР.

1999 год – стартует проект «Геном человека».

2001 год – полностью расшифрована структура ДНК 3 человеческих индивидуумов.

2006 – Ямахаба, Топохачи откр явление РНК-интерференции и генный нокаут.

· История изучения белков

1728 год – Я. Беккери выделяет первый препарат белкового вещества белкового происхождения

1753 год – К. Нейман выделяет из куриного яйца белок альбумин и открывает явление денатурации

1806 год – Ваклен выделяет первую АК – аспарагин (из спаржи)

1846 год – Мульдер разрабатывает протеиновую теорию белков.

1858 год – Мошне получает первые кристаллы белков

Конец 19 века – Фишер разрабатывает пептидную теорию белков., согл кот белки сост из АК, соед пептид связями.

1915 год – У. Брэгг впервые проводит рентгеноструктурный анализ белков и использует его для изучения пространственной стр-ры белков.

30-40 гг. 20 века – Астбери изучает простр-ую структуру фибриллярных белков.

1951 год – Польминг открывает вторич структуру белков

1960 год – Дж. Кендрю изучает 3-мерную структуру меоглобина

1968 год – Перуту изучает 3-мерную структуру гемоглобина.