Тема: медична ензимологія: ензимодіагностика, ензимопатологія, ензимотерапія.

Актуальність теми: Знання причин ензимопатологій необхідне для своєчасної діагностики і лікування таких захворювань. Використання діагностичних ферментативних методів і застосування ензимів з лікувальною метою має важливе значення в практичній діяльності лікаря.

Навчальні цілі:

Знати: Причини виникнення ензимопатологій, принципи визначення ферментів у біологічних рідинах, використання ферментів з діагностичною і лікувальною метою.

Вміти: Визначати активність ферментів у біологічних рідинах і давати клініко-діагностичну оцінку одержаним результатам.

Самостійна позааудиторна робота

В зошитах для протоколів:

1. наведіть приклади з ензимотерапії, ензимодіагностики і ензимопатології.

2. підготуйте вихідні дані для оформлення протоколу лабораторної роботи “Визначення активності амілази (діастази) сечі методом Вольгемута”.

Контрольні питання

1. Основні аспекти сучасної ензимодіагностики.

2. Розподіл ферментів у організмі: клітинні, секреторні, екскреторні ферменти.

3. Ізоферменти, їх значення в ензимодіагностиці.

4. Ензимопатології, ензимопатії.

5. Ензимотерапія, застосування ферментів в клінічній практиці.

6. Інгібітори ферментів як лікарські середники.

 

Самостійна аудиторна робота

І. Дайте відповіді на поставлені запитання:

1. В сечі новонародженої дитини виявлена фенілпіровиноградна кислота. Назвіть патологію і вкажіть причину, з якою пов’язана поява цього компоненту в сечі

2. Підвищена активність ЛДГ є характерною для хвороб серця, печінки, нирок. Яке додаткове біохімічне дослідження потрібно провести для уточнення діагнозу?

3. У хворого в сечі підвищена амілазна активність і виявлено наявність трипсину, в крові підвищена амілазна активність. Про патологію якого органу це свідчить?

4. Назвіть специфічні ферменти для:

підшлункової залози, печінки, міокарду, шлунку.

ІІ. Виконати лабораторну роботу “Визначення активності амілази (діастази) сечі методом Вольгемута”

і захистити протокол.

Принцип методу. Метод грунтується на визначенні мінімальної кількості ферменту, яка здатна розщепити певну кількість субстрату. Умовно за одиницю активності амілази сечі приймають кількість мілілітрів 0,1% р-ну крохмалю, яку може розщепити 1 мл нерозведеної сечі при температурі 45^оС за 15 хв. В нормі - 16-64 одиниць.

Хід роботи. У 8 пробірок наливають по 1 мл 0,85% хлориду натрію. У першу пробірку додають 1 мл сечі, перемішують і переносять 1 мл суміші в другу пробірку. Так само перемішують вміст другої пробірки і переносять 1 мл суміші в третю і т. д. Отримують ряд розведень, де концентрація ферменту в кожній наступній пробірці в два рази менша, ніж у попередній. З останньої пробірки 1 мл суміші виливають для вирівнювання об’ємів.

Далі у кожну пробірку наливають по 2 мл розчину крохмалю, добре перемішують і ставлять на 15 хв у водяну баню при температурі 45^оС. Після цього пробірки охолоджують проточною водою і в кожній проробляють реакцію з йодом. Відмічають останню пробірку з жовтим забарвленням, де гідроліз крохмалю пройшов повністю і розраховують активність амілази сечі.

 

Наприклад: 1/8 мл сечі розщепила 2 мл 0,1% р-н

 

1 мл сечі ------------------------------”Х”.

 

1 х 2 х 8

Активність амілази Х= ----------- = 16 мл 0,1% розчину крохмалю.

 

Отже, Д (діастаза) 45^оС/15 = 16 од.

Клініко-діагностичне значення

Визначення активності α-амілази сечі широко використовується в клінічній практиці з метою діагностики захворювань підшлункової залози. При гострих панкреатитах амілазна активність сечі і сироватки крові зростає в 10-30 разів, особливо в першу добу, потім поступово повертається до норми. При нирковій недостатності амілаза сечі відсутня.

 

Література

1. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. Біохімія людини. Тернопіль: Укрмедкнига, 2001. – 736с.

2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – 508с.

3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини. Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – 744с.

Обговорено і затверджено на засіданні кафедри, протокол №1 від 28.08.2008р.

Зав. кафедрою проф. Ерстенюк А.М.

 

 

ЗАНЯТТЯ № 9