Вопрос 2. Питательные среды, их классификация.

По проис-хождению	Естественные – натуральные продукты животного, растительного или микробного происхождения	Молоко, сыворотка, кровь, картофель, морковь
Синтетические – химически чистые соединения в строго определенных концентрациях = минимальные среды	Основа: минеральные соли и глюкоза
Полусинтетические – минимальные среды, к которым добавлен пептон и дрожжевой экстракт
По сложности изготов-ления	Простые – выпускаются промышленностью в сухом виде; основу их составляют пептоны – продукты ферментативного или кислотного гидролиза белков животных и рыбы	Питательный бульон, питательный агар
Сложные - готовятся на основе простых: добавляют 1% сахара, 10-20% сыворотки крови или 5-10% крови	Кровяной агар, сахарно-сывороточный агар
По консис-тенции	Жидкие – мясной или рыбный бульон на дистиллированной воде	Питательный бульон
Плотные– готовятся на основе жидких, добавляют 1,5% агар-агара или силикагеля или 10-15% желатины	Питательный агар
Полужидкие – готовят на основе жидких, но агар-агара или силикагеля добавляют 0,7%, а желатины – 5-7,5%	Полужидкий питательный гар
По наз-начению	Консервирующие – применяются для предотвращения отмирания бактерий в патологическом материале	Глицериново-солевая смесь
Основные– применяются для культивирования большинства бактерий	Питательные бульон и агар
Элективные – обеспечивают оптимальные условия для выращивания одного вида бактерий	Желточно-солевой бульон для стафилококка, желчный бульон для сальмонелл
Дифференциально-диагностические – применяются для изучения биохимических свойств при идентификации бактерий	Среды Гисса, Ресселя, Эндо

 

Вопрос 3. Понятие о стерилизации, методы стерилизации.

Асептика– система мероприятий, предупреждающих внесение микроорганизмов из окружающей среды в ткани или полости организма человека при лечебных и диагностических манипуляциях, а также в материал для исследования, в питательные среды и культуры микроорганизмов при лабораторных исследованиях

Антисептика– комплекс лечебно-профилактических мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов, способных вызвать инфекционный процесс на поврежденных или интактных участках кожи и слизистых оболочек. Антисептики: 70% этиловый спирт, 5% спиртовой р-р йода,0,5-2% раствор хлорамина, 0,1% р-р КМnO4, 0,5-1% р-р формалина, 1-2% р-ры метиленового синего или бриллиантового зеленого

Дезинфекция– обеззараживание объектов окружающей среды: уничтожение патогенных микроорганизмов с помощью химических веществ: хлорная известь – 0,1-10% р-р, хлорамин – 0,5-5% р-р, фенол или карболовая кислота – 3-5% р-р, лизол – 3-5% р-р

Стерилизация – обеспложивание, т.е. полное уничтожение вегетативных форм м/о и их спор в различных материалах

1) Физические методы стерилизации:

Прокаливание – в пламени спиртовки (петли, инструменты)

Кипячение – в воде с добавлением 1-2% р-ра бикарбоната натрия 30 мин (шприцы, мелкий хирургический инструментарий, предметные стекла)

Сухим жаром в печи Пастера – нагревание до 165-170^0в течение 45 мин (чашки Петри, пробирки, пипетки)

Паром под давлением в автоклаве – большинство питательных сред – Р = 1 атм (t = 121 ^0C) 20 мин; среды с углеводами – Р = 0,5 атм (t = 111 ^0C) 15 мин; уничтожение патогенного материала – Р = 2 атм (t = 133^0C) 20-25 мин. Для контроля качества стерилизации в автоклав помещают ампулы с бензонафтолом (Тпл = 110 ^0С) или с бензойной кислотой (Тпл = 120 ^0С)

Текучим паром в автоклаве – при незавинченной крышке и открытом выпускном клапане при Т=100 ^0С по 20-30 мин 3 дня (среды с витаминами или углеводами)

Тиндализация – дробная стерилизация при Т = 56-58 ^0С 5-6 дней подряд (сыворотка крови, витамины)

Пастеризация – нагревание при Т = 56-65 ^0С с последующим быстрым охлаждением (вино, пиво, соки, молоко)

Ультрафиолетовыми лучами - с длиной волны 260-300 мкм лампами БУВ-15, БУВ-30 (воздух) или гамма-лучами (одноразовые шприцы, системы)

2) Механическая стерилизация (фильтрование) – – задержка м/о, их спор мелкопористыми фильтрами (керамическими, асбестовыми, стеклянными) с определенным диаметром (сыворотка крови, антибиотики)

3) Химическая стерилизация– – газами: формальдегид и окись этилена в специальных камерах при 40-80 ^0С (оптика, некоторые питательные среды)

 

Вопрос 4. Дыхание бактерий.

Дыхание бактерий илизнергетический обмен веществ – цепь последовательных окислительно-восстановительных реакций, сопровождающихся переносом электронов от окисляющей системы к восстанавливающей и катализируемых строго специфичными ферментными системами.

По типу дыхания бактерии могут быть:

1.Облигатные аэробы – они не развиваются без доступа кислорода, используют энергию, освобождающуюся при реакциях окисления, протекающих с поглощением свободного молекулярного кислорода. Растут на поверхности питательных сред.

Например: холерный вибрион, возбудители сибирской язвы и туберкулеза

2. Облигатные анаэробы - кислород для них – яд. Они осуществляют ферментативное расщепление углеводов в анаэробных условиях – брожение.Растут на дне или в толще плотной питательной среды.Например: клостридии столбняка, ботулизма, газовой анаэробной инфекции

3. Факультативные анаэробы - р астут как при доступе кислорода, так и при его отсутствии. Используют энергию как от окислительных реакций, так и от брожения.

Например: эшерихии, сальмонеллы, стафилококки

Среди них выделяют:

А) Микроаэрофилы -хорошо растут при пониженном содержании кислорода.

Например: молочнокислые бактерии

Б) Капнеические -требуют повышенной концентрации СО_2.

Например: бычий тип бруцелл, бифидумбактерии