Тема: взаимодействие вирусов С чувствительными клетками. Культивирование. Способы индикации и идентификации. Противовирусный иммунитет.

ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ

1. Вирусы, природа и происхождение. История открытия. Этапы развития вирусологии. Понятие о вирионе, его структура. Химический состав и свойства вирусов.

2. Принципы классификации вирусов - критерии. Семейства РНК и ДНК-содержащих вирусов (контрольная).

3. Тропизм вирусов. Взаимодействие вирусов с чувствительными клетками - фазы.

4. Культивирование вирусов. Индикация и идентификация вирусов при культивировании их на клеточных культурах и курином эмбрионе. Клеточные культуры, линии клеток, получение, условия культивирования.

5. Классификация вирусных инфекций: а) на уровне клетки; б) на уровне организма.

6. Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций. Прямые методы исследования клинического материала (обнаружение вирусов, вирусных антигенов или вирусных НК). Вирусологический метод диагностики. Серодиагностика вирусных инфекций.

7. Противовирусный иммунитет - факторы. Видовая резистентность. Неспецифические факторы антивирусной защиты (ингибиторы, интерферон, комплемент, фагоцитоз). Приобретенный иммунитет (гуморальные и клеточные механизмы).

8. Принципы специфической профилактики и терапии вирусных инфекций: вакцины, иммунные сыворотки (иммуноглобулины), интерфероны, этиотропная химиотерапия.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Методы	Принцип
1. Экспресс-диагностика
2. Вирусологический метод
3. Серодиагностика

 

1. Для ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ используют:

а) определение вирусного антигена в исследуемом материале с помощью диагностических противовирусных сывороток в реакциях: РИФ, ИФА, РИА, встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ), реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и др.;

 

б)обнаружение включений в пораженных клетках макроорганизма с помощью световой или люминесцентной микроскопии;

Тельца Бабеша-Негри в срезе гиппокампа. Окраска по Муромцеву. Увеличение _________     Streptococcus pyogenes (чистая культура) Окраска по Граму Увеличение _____________

 

в) обнаружение вирионов в патологическом материале с помощью электронной микроскопии или ИЭМ.

г) обнаружение геномов вируса молекулярно-генетическими методами: ПЦР; молекулярная гибридизация нуклеиновых кислот с помощью меченых зондов.

 

ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД

Основные этапы:

1. Забор исследуемого материала.

2.Выбор по принципу цитотропизма и получение чувствительной тест-системы, определение ее жизнеспособности.

3. Заражение выбранной системы.

4.Индикация вируса на основании обнаружения его нуклеиновой кис­лоты, антигенов, гемагглютинина, ЦПД, включений.

5. Идентификация и титрование вируса проводится на основании:

а) определения антигенов вируса с помощью иммунологических реакций (РИФ, ИФА, РПГА, РСК, РН, ВИЭФ и др.); б) патогистологического исследования органов и тканей; в) ЦПД; г) клинических симптомов, биологических проб (кератоконьюнктивальная и др.).

ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД (схема)

Исследуемый материал (фекалии, носоглоточные смывы, секционный материал и др.)

 

 

 

 

 

Примечание: титрование и идентификация вируса проводится с использованием одного и того же феномена.

Культивирование вирусов

Вирусы - облигатные внутриклеточные паразиты, не способные размножаться ни в одной из бесклеточных сред. Для их культивирования используются: 1) куриные эмбрионы; 2) культуры клеток (тканей, органов); 3) лабораторные животные.

Куриный эмбрион (КЭ)

Обозначьте на рис. структурные элементы КЭ:

а) хорионаллантоисная оболочка;

б) аллантоисная полость;

в) амнион;

г) желточный мешок.

 

Методы заражения куриных эмбрионов:
Феномены, позволяющие выявить вирус в курином эмбрионе: