Схема микробиологической диагностики пневмококковых инфекций

 

МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: мокрота, гной, СМЖ, плевральная жидкость, слизь из гортани, кровь

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: бактериоскопический, бактериологический (основной), биологический, серологический, аллергологический, молекулярно-генетический, экспресс-диагностика

 

Бактериоскопический метод	Бактериологический метод	Биологический метод	Серодиагностика
Мазок из исследуемого материала, окраска по Граму, Бурри-Гинсу, микроскопия. Предварительный ответ.	I ЭТАП:Посев на сахарный агар, сахарный бульон (5 – 10% СО2,37^○С, 24ч) II ЭТАП: 1. Описание характера роста. 2. Отбор подозрительных колоний. 3. Мазок из подозрительных колоний, окраска по Граму, микроскопия. 4. Посев на сывороточный или кровяной агар (37^○С, 24ч) III ЭТАП: 1. Контроль чистоты культуры: а) визуально; б) микроскопически. 2. Идентификация выделенной культуры: а) проба с инулином; б) проба с желчью, оптохином, желче-эскулиновый тест в) рост в бульоне, содержащем 6,5% NaCl; г) РА на стекле с типовыми пневмококковыми сыворотками. 3. Определение чувствительности к антибиотикам. IV ЭТАП:Учет полученных результатов. Окончательный ответ.	I ЭТАП:Внутрибрюшинное введение белым мышам исследуемого материала (наблюдение) II ЭТАП: 1. Вскрытие животных. 2. Приготовление мазков-отпечатков из органов, окраска по Граму, микроскопия. 3. Посев на кровяной агар. Далее исследование проводится по схеме бактериологического метода, начиная со 2-го этапа.	1. РИФ (непрямой метод) 2. ИФА 3. Ко-агглютинации 4. Слайдовая агглютинация 5. Omni- тест (определение антигенов капсулы в реакциях с иммунными сыворотками) Молекулярно-генетические методы ПЦР
Ускоренные методы	Аллергологический метод
1. Реакция Нейфельда – феномен набухания капсулы при микроскопии мокроты, смешанной с типовыми пневмококковыми сыворотками. 2. Метод Сейбина: в брюшную полость белым мышам вводят исследуемый материал, через 5-6 часов ставится реакция агглютинации на стекле с экссудатом и типовыми пневмококковыми сыворотками.	Кожная проба с пневмококковым аллергеном.

 

СХЕМА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ МЕНИНГОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ

 

МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: спинномозговая жидкость, кровь, отделяемое петехий, секционный материал

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: бактериоскопический, бактериологический (основной), серологический, молекулярно-генетический, экспресс-диагностика

 

Бактериоскопический метод	Бактериологический метод	Серодиагностика
СМЖ 1. Центрифугирование, приготовление мазка из осадка, окраска по Грамму, метиленовым синим, микроскопия. Предварительный ответ.   КРОВЬ Микроскопия препарата «толстая капля». Предварительный ответ.	I ЭТАП: 1. СМЖ 2. Кровь из вены Посев на свежеприготовленные питательные среды, подогретые до 37^0С: а) кровяной или сывороточный агар; Посев на полужидкий агар (среда б) 0,1% полужидкий агар обогащения) в соотношении 1:10 (среда обогащения)   Инкубация при +37^0С 18-24 часа в атмосфере с 5-7% СО2 II ЭТАП: 1. Описание характера роста. 2. Отбор подозрительных колоний. 3. Мазок из подозрительных колоний, окраска по Граму, микроскопия. 4. Проба на оксидазу. 5. Посев на скошенный сывороточный агар. III ЭТАП: 1. Контроль чистоты культуры: а) визуально; б) микроскопически. 2. Посев на среды «пестрого» ряда. 3. РА на стекле с групповыми сыворотками. 4. Определение чувствительности к антибиотикам. IV ЭТАП:Учет полученных результатов. Окончательный ответ^1.	1. РА 2. РНГА с эритроцитарными менингококковыми диагностикумами 3. ИФА 4. Латекс- реакция   Молекулярно-генетический метод ПЦР   Экспресс-диагностика Реакция ко-агглютинации Реакция латекс-агглютинации ИФА

 

____________________________

¹Окончательный отрицательный ответ выдают не ранее 7-ого дня, когда при последнем высеве из среды обогащения (7 дней инкубации) не обнаруживается роста бактерий