Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Общая схема исследования на фос
Подготовка объекта: измельчить ↓ Выделение: 1) настаивание с органическим растворителем (экстракция) 2) настаивание с водой, подкисленной серной кислотой, с последующей экстракцией. ↓ Очистка экстракта ↓ Получение сухого остатка (водяная баня, ротационный испаритель) ↓ Растворение ↓ Исследования на ФОС: 1) предварительные, 2) подтверждающие, ) количественное определение. Характеристика некоторых методов изолирования
Примечания: Объект без глубокого гнилостного разложения - 1 - 3 дня хранения. Количество исследуемого биоматериала: для изолирования метафоса - 25 гр., для изолирования хлорофоса и карбофоса - 20- 100 гр. При исследовании крови ее берут из вены или артерии, добавляют гепарин, а затем исследуют. Реакцию среды создают серной или соляной кислотой. Доказательства наличия ФОС . Предварительные исследования. .Предварительная проба - холинэстеразная. Носит отрицательное судебно-химическое значение. Проба выполняется в трех чашках Петри, заполненных агар - агаром. Первая - «холостой опыт». Содержит агар-агар, в лунку которого внесена капля ацетилхолина, капля сыворотки, содержащей ацетил-холинэстеразу и капля индикатора бромтимолового синего. Вторая чашка - стандартная. Содержит те же компоненты, что и первая, но и каплю стандартного вещества - ФОС. В третью чашку Петри с агар-агаром вносят компоненты, как и в первую, но добавляют каплю исследуемого экстракта. После термостатирования цвет индикатора изменяется в чашках, где нет ФОС от синего к желтому. Во второй чашке, где был стандарт и в третьей, если в исследуемом экстракте был ФОС цвет индикатора остается синим, так как ФОС блокирует холинэстеразу, ацетилхолин не разлагается и рН среды не изменяется.
Схема холинэстеразной пробы:
) АХ + АХЭ + ИНД (синий) → Холин + CH3COOH + ИНД (желтый)
) АХ + АХЭ + ФОС + ИНД (синий) → АХ + ИНД (синий)
4) АХ + АХЭ + ЭКСТРАКТ + ИНД (синий) → АХ + ИНД
(цвет по наличию ФОС в экстракте) Термостатирование при 380- 400С 30 минут. Используемый индикатор - бромфеноловый синий. Принцип: Ацетилхолин при энзиматическом расщеплении ацетилхолинэстеразой, находящейся в сыворотке, образует холин и уксусную кислоту. Образующаяся CH3COOH меняет реакцию среды на кислую и ведет к изменению цвета индикатора. ФОС из исследуемого экстракта диффундирует в слой агар - агара, ингибирует фермент, ацетилхолин не расщепляется, реакция среды не меняется, цвет индикатора также не меняется. Методика пригодна для биоматериала, хранящегося не более 5 дней при комнатной температуре. Продукты гниения угнетают активность холинэстеразы. Поскольку ФОС обладают слабым ингибирующим действием in vitro, а при их окислении действие усиливается, то пробу проводят как с активацией бромом, так и без нее. Методика активации: к органическому извлечению добавляют бром, через 30 минут избыток брома удаляют 0,1 М раствором тиосульфата натрия. Методика не специфична (дают ФОС и карбаматы). Однако, проста, наглядна, удобна при серийных исследованиях. Определение фосфора после минерализации. Минерализация действием сильных концентрированных кислот. Фосфат - ион определяют молибдатом аммония в азотно- кислой среде - желтое окрашивание, после добавления восстановительной смеси (бензидин и гидроксид аммония) - синее окрашивание молибденовой сини; ТСХ - в частных системах растворителей Метафос Система: хлороформ - н-гексан или бензол Проявитель: раствор бромтимолового синего, содержащий серебра нитрат, термостатирование при 600С 20 минут. Обработка уксусной кислотой. Пятна лилового цвета. Хлорофос Система: ацетон-н-гексан. Проявитель: раствор резорцина и карбоната натрия - пятна оранжевого цвета, после термостатирования при 1000С 5 минут. Карбофос Система: ацетон-н-гексан
Проявитель: раствор бромтимолового синего, содержащий серебра нитрат, термостатирование при 600С 20 минут. Обработка уксусной кислотой. Пятна лилового цвета. . Подтверждающие исследования: Метафос . реакция Шенемана (действие 0-дианизидина и пербората натрия) - желтое или красноватое окрашивание. . спектры в УФ - области. Хлорофос . с резорцином в щелочной среде - розовое окрашивание; . проба Фудживара (с пиридином в щелочной среде)- розовое или красное окрашивание; . с 2,4-динитрофенилгидразином - сине-фиолетовое окрашивание. Карбофос . с реактивом Марки - оранжевая окраска, переходящая в темно-коричневую. . МКС реакция с хлоридом ртути. Наблюдают игольчатые кристаллы. . МКС с реактивом Драгендорфа. Иглы темно-бурого цвета. . реакция с диазотированной сульфаниловой кислотой в щелочной среде при нагревании, вишнево-красное окрашивание. Количественное определение: а) ГЖХ; б) фотометрия на основе реакции образования молибденовой сини, для хлорофоса на основе реакции с 2,4-динитрофенилгидразином. Хлорорганические пестициды 1.Общая характеристика группы. . Представители . Токсичность. . Пути метаболизма. . Химико-токсикологический анализ.
Общая характеристика Токсикологическое значение из хлорорганических пестицидов имеют 4 группы: ) ДДТ и его аналоги ) группа гексахлорциклогексана (ГХЦГ) ) полихлорциклодиены(ГПХ) ) токсафен и его производные Группа ДДТ: Название группы соответствует токсичному инсектециду дихлордифенилдихлорметилметану. Эмпирическая формула С14Н9Cl5. С 1939г стали известны его инсектецидные свойства и началась эра синтетических органических пестицидов. Токсичен и аналог ДДТ - метоксихлор. Селективные инсектициды. ДДТ обладает нейро-, эмбрио-, иммунотоксичностью, мутагенным действием. Обладают способностью к кумуляции, долго сохраняются в природе. Производство и применение ДДТ в СССР запрещено с 1972 года, но его до сих пор можно найти на всех уровнях биосферы.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2020-03-02; просмотров: 761; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.15.147.53 (0.009 с.) |