Постановка реакции гемагглютинации

Вирусы, обладающие гемагглютинирующими свойствами (имеющие гемагглютинин – гликопротеид суперкапсида), способны гемагглютинировать эритроцитов различных животных. Например, вирусы гриппа гемагглютинируют куриные эритроциты.

Компоненты реакции: исследуемый материал – аллантоисная жидкость (неизвестно наличие гемагглютинина вируса гриппа); 5% суспензия куриных эритроцитов; физиологический раствор. 

 Существует два способа постановки реакции: капельный способ на стекле и объемный способ в пробирке.

Капельный способ постановки реакции гемагглютинации на стекле.

На предметное стекло (контроль) с помощью стерильной пипетки нанесите 1 каплю физиологического раствора и 1 каплю 5% суспензии куриных эритроцитов.

На второе предметное стекло (опыт) с помощью стерильной пипетки нанесите 1 каплю аллантоисной жидкости и 1 капля 5% суспензии куриных эритроцитов.

Хорошо перемешайте сначала контрольную каплю, затем – опытную.

Наличие гемагглютинации (выпадение хлопьев красного цвет) в опыте при ее отсутствии в контроле (гомогенное покраснение) указывает на содержание вируса гриппа в исследуемом материале.

Гемагглютинация – это склеивание эритроцитов под влиянием гемагглютинина вируса. Вид вируса гриппа (А, В, С) дифференцируют по антигенной структуре с помощью РСК, ИФА, а серотип – РТГА. Окончательную идентификацию также можно провести по генетической структуре (ПЦР).

 

9. Контроль освоения заданий по самостоятельной контактной работе.

9.1. Выполнить тестовые задания.

9.1.1. Выберите один наиболее правильный ответ.

 

1. ТЕХНОЛОГИЮ ГЕННОЙ ИНЖЕНЕРИИ МИКРООРГАНИЗМОВ ОБЫЧНО ИСПОЛЬЗУЮТ ДЛЯ

1) создания штаммов, продуцирующих необходимые вещества

2) выделения чистых культур возбудителей

3) оценки устойчивости к антибиотикам

4) измерения уровня антител в сыворотке

 

2. ПРОЦЕСС ПЕРЕНОСА ГЕНЕТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ОТ ДОНОРА К РЕЦИПИЕНТУ С ПОМОЩЬЮ БАКТЕРИОФАГА НАЗЫВАЕТСЯ

1) транскрипцией

2) трансляцией

3) трансдукцией

4) трансформацией

 

3. ОДНИМ ИЗ ВИДОВ ГОРИЗОНТАЛЬНОГО ПЕРЕНОСА ГЕНОВ ЯВЛЯЕТСЯ

1) трансформация

2) трансляция

3) трансаминирование

4) транспозиция

4. ПЛАЗМИДЫ СПОСОБНЫ

1) переносить гены устойчивости к антибиотикам и гены токсинов

2) разрушать бактериальные клетки

3) нарушать синтез пептидогликана бактериями

4) снижать уровень иммунного ответа

 

8.1.4. Установите соответствие.

5. Установите соответствие между факторами наследственности бактерий и их характеристикой: к каждой позиции, данной в первом столбце, подберите соответствующую позицию из второго столбца.

характеристика

факторы наследственности бактерий

А) Подвижные генетические элементы ДНК бактерий, имеющие в своем составе гены, отвечающие за перемещение (транспозицию) в различные участки ДНК и не имеющие структурные гены Б) Подвижные генетические элементы ДНК бактерий, имеющие в своем составе структурные гены В) Небольшие кольцевидные двунитевые молекулы ДНК, способные удваиваться независимо от хромосомы хозяина Г) Хромосома, представленная двунитевой кольцевой молекулой ДНК

1. Плазмиды 2. Транспозоны 3. Is-последовательности 4. Нуклеоид

 

8.1.5. Установите соответствие.

6. Установите соответствие между типами генетической рекомбинации бактерий и их характеристикой: к каждой позиции, данной в первом столбце, подберите соответствующую позицию из второго столбца.

характеристика	типы генетической рекомбинации бактерий
А) Передача генетического материала от клетки-донора в клетку-реципиент с помощью бактериофага. Б) Передача генетического материала от клетки-донора в клетку-реципиент с помощью плазмид. В) Непосредственный захват, поглощение и встраивание в свой геном бактерией-реципиентом фрагментов ДНК погибших бактерий из питательной среды.	1. Конъюгация   2. Трансформация 3. Трансдукция

 

8.1.3. Для каждого вопроса один или несколько ответов являются правильными. Выберите ответ:

Верно	1, 2, 3	1, 3	2, 4	1, 2, 3, 4
Ответ	А	Б	В	Г

 

1. К внехромосомным факторам наследственности бактерий относятся

1) плазмиды

2) транспозоны

3) IS-последовательности

4) нуклеоид

 

 

2. Для всех бактерий характерны следующие свойства

1) они гаплоидны

2) их генетический материал организован в единственную хромосому

3) имеют обособленные фрагменты ДНК – плазмиды, транспозоны, IS-последовательности

4) они используют тот же самый генетический код, что и эукариоты

 

3. К факторам рекомбинативной изменчивости бактерий относится

1) трансдукция

2) трансформация

3) конъюгация

4) мутация

 

4. Для процесса репликации ДНК бактерий характерны следующие признаки

1) связана с делением клетки

2) начинается в единственном уникальном сайте

3) требует синтеза РНК-затравки

4) определяется IS- последовательностями

 

8.3. Решить ситуационные задачи.

Задача 1. При получении генно-инженерного инсулина какие микроорганизмы используются в качестве продуцентов?

Задача 2. При промышленном получении рекомбинантных белков выбор микроорганизма-продуцента зависит от многих факторов. Определите критерии отбора микроорганизма.

 

9. Итоговый контроль по темам № 4 – 8.

9.1. Выполнить тестовые задания (тестовые задания прилагаются)

9.2. Ответить на вопросы билета к итоговому контролю (билеты прилагаются)

9.3. Решить ситуационные задачи (задачи прилагаются).

 

 

Практическое занятие № 9