Определение общей кислотности и содержания свободной соляной кислоты.

В колбу для титрования вносят из микробюретки 5 мл исследуемого желудочного сока. Добавляют 1-2 капли р-ра диметиламиноазобензола и 2 капли р-ра фенолфталеина. Пробу титруют 0,1 н NaOH до появления оранжевой окраски и отмечают количество щелочи в миллилитрах, последнее на титрование свободной  HC1. Далее титрование продолжают до появления лимонно-желтой окраски и снова отмечают количество щелочи в миллилитрах, израсходованное с начала титрования.

Затем титрование продолжают до появления розовой окраски. Отмечают кол-во щелочи, ушедшее на последнее титрование.

49.Анализ желудочного сока. Анализ желудочного сока проводят для выявления заболеваний желудка и контроля за состоянием его выделительной функции в процессе лечения. Анализ желудочного сока является очень важным.Химический анализ содержимого желудка позволяет судить о кислотообразующей и ферментной функциях. Для исследования желудочного сока применяются такие реакции, как: цветная реакция на свободную соляную к-ту, кот.позволяет выявить наличие HCl – появляется синее окраш.; реакция на молочную к-ту-; реакция на кровь с бензидином – если желудочный сок содержит кровь, то проба развивает синее окрашивание. Для определения общей кислотности и свободной соляной кислоты используется метод титрования 0,1н раствором NаОН в присутствии соответствующих индикаторов (фенолфталеина и диметиламиноазобензола). Кислотность желудочного сока оценивается в единицах кислотности по количеству миллилитров 0,1н раствора NAOH, необходимого для нейтрализации 100 мл желудочного сока.

50. Исследование действия пепсина. В основе метода лежит способность пепсина в жел.соке створаживать белок молока – казеиноген. Створаживание бности переваривать белки.за единицу активности пепсина принимают то его кол-во,кот.при указанных условиях створаживает 5мл молочно-ацетатной смеси за 60с. Значение:желудочный сок в норме содержит 40-60ед.пепсина. при ахилии уропепсин в моче и пепсин в желуд.соке могут полностью отсутствовать,а при язв.болезни желудка кол-во пепсина резко увеличино.

51.переваривание белков подж.ж. Белки и полипептиды,не расщепившиеся в желудке, подвергаются действию сока поджелудочной железы. Их переваривание мы изучали на лабораторных занятиях с помощью панкреатина. Панкреатин – сухой ферментный препарат, получ.из панкреатич.железы. О действии панкреатина можно судить по расщеплению белка фибрина, окрашенного генциановым фиолетовым или кармином,так как краска при этом переходит переходит в р-р. В 3 пробирки наливают по 3 мл панкреатина. 1 пробирку оставл.без изменений, 2 кипятят, 3 подкисляют 2%р-ром уксусной к-ты. Во все 3 пробирки добавляют по 100мг окраш.фибрина и помещают в термостат 38’ на 15-20мин. Отмечают окраш.жидкости,где фермент активен.

52 определение кол-ва креатинина в моче. Клинико-диагност значение. Креатининяв-ся одним из конечных продуктов азотистого обмена и нормальной составной частью мочи. ПРИНЦИП МЕТОДА: креатинин при взаимодействии с пикриновой кислотой в щелочной среде образует окрашенные соединения, интенсивность окраски которых пропорциональна конц. креатинина в моче. ХОД: в цилиндр наливают мочу и прибавляют р-р щелочи и насыщенный р-р пикриновой кислоты. Одновременно ставят один контроль с водой, наливая в цилиндр дистил воды и все реактивы, как и с мочой. Взбалтывают и доводят дистил водой до объема 10 мл.фотометрируют против контроля на ФЭЛК с зеленым светофильтром в кювете и находят показание оптической плотности. По готовому калибровочному графику определяют количество креатинина в 0,1 мл мочи и подсчитывают содержание его в моче, выделенной за сутки. КЛИНИКО-ДИАГНОС ЗНАЧ-Е: повышенное выделение креатинина с мочой набл-ся при приеме мясной пищи, размозжении мягких тканей, синдроме длительного раздавливания, тяжелой мышечной работе, лихорадочных состояниях. Пониженное содержание креатинина отмечается при хроническом нефрите с уремией, мышечной атрофии, дегенерации почек, лейкемии, в старческом возрасте.

53. определение кол-ва мочевины в сыворотке крови, клин-диагносзн-е. в норме в сыворотке крови сод-ся мочевины 3,33-8,32 ммоль/л. Примерно 50% небелкового остаточного азота крови приходится на долю мочевины. ПРИНЦИП МЕТОДА: мочевина образует с диатцетилмонооксидом при наличии тиосемиварбазида и солей железа в сильнокислой среде при нагревании комплекс красного цвета. Интенсивность окраски зависит от конц мочевины в крови. ХОД: в центрифужнуюпро-ку берут воду и доб-ют сыворотку крови и р-р трихлоруксусной к-ты и перем-ют. Одновр-но в обычной про-ке готовят пробу со стандартным р-ом мочевины вместо сыворотки. Через 15 мин про-ку с сывороткой центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10 мин. Затем в одну пр-ку вносят надосадочную жидкость, а в другую станд р-р мочевины. И в каждую приливают цветной реактив, перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 20 мин. Затем охлаждают под водой. Фотометрируют при зеленой светофильтре. Х=Еоп/Ест х 100. КЛИН-ДИАГ ЗН-Е: снижение кону мочевины отмечается при паренхиматозном гепатите, циррозе, во время беременности и эклампсии. Повешение может наблюдаться при нефритах, лихорадочных состояниях, сепсисе, туберкулёзе почек и тд.

54. качественные реакции подтверждающие белковую природу инсулина. 1 - биуретовая реакция. К 1 мл р-ра инсулина доб-ют 5-6 кап р-ра гидроксида натрия и 1-2 капли р-ра сульфата меди и перемешивают. Жидкость окрашивается в розово-фиолетовый цвет. 2- реакция Миллона. К 5-10 кап р-ра инсулина доб-ют 2-3 капли реактива Миллона и осторожно нагревают. Образуется осадок в виде сгустка красного цвета. 3-реакция Фоля. К 5-10 каплям р-ра инсулина доб-ют 2-3мл р-раNAOН и кипятят 10 мин на малень пламени горелки. После охлаждения доб-ют 1-2 капли р-раPb(ONa)2, появ-ся бурое окрашивание.

55. открытие наличия адреналина. Адреналин обладает слабощелочной реакцией, легко окисляется на воздухе с образованием адренохрома, вследствие чего р-р окрашивается в красный цвет. При взаимодействии с нитритом набл-ся желто-оранжевое окрашивание, с диазореактивом- красное, с хлорным железом-зеленое. Реакция с хлорным железом харак-на для пирокатехинового кольца, входящего в молекулу адреналина и норадреналина. ХОД: в про-ку нал-ют р-р адреналина и доб-ют 1 каплю хлорного железа. Набл-ся зеленое окрашивание. После добавления едкого натра набл-сявишнего-красное окрашивание.

56. качественные реакции на фолликулин. Качественная реакция на фолликулин проводится с конц серной кислотой и обусловлена образованием эфирного соединения соломенно-желтого цвета с зеленой флюоресценцией. ХОД: 1. В пр-ку нал-ют спиртовой р-р фолликулина и помещают в кипящую водяную баню для удаления спирта. Затем доб-ют конц серную кислоту и ставят обратно в водяную баню. Жидкость постепенно приобретает соломенно-желтое окрашивание, переходящее при нагревании в оранжевое.

57. открытие хлоридов, фосфатов, сульфатов в моче.

58. открытие железа и кальция в крови и моче.

1. метод основан на способности органических соединений – комплексонов – взаимодействовать с ионами кальция. Ход: в две широкие пробирки Хагедорна наливают по 5 мл р-ра мурексида. В опытную пробирку вносят 0,2 мл исследуемой сыворотки крови. Титруют из микробюретки р-ром трилона Б до исчезновения розовой окраски и вос-ия фиолетового цвета. Расчет: ч= V*0,12*100

2. сыворотку крови подвергают минерализации, в результате чего железо освобождается из органических соединений и вступает в реакцию с тиоцинатом калия, образующее соединение, дающее в кислой среде розово-красное окрашивание. В норме содержание железа в сыворотке крови составляет 80-160 мг\дл.

59 исследование физико-химических свойств мочи: относит плотность, цвет, прозрачность, рН.. 1- плотность мочи. Относительная плотность зависит от кол-ва растворимых веществ в моче. Обычно составляет 1,017-1,020. ХОД: в небольшой цилиндр наливают мочу и осторожно погружают в нее урометр. Производят отсчет, беря ту линию на шкале урометра, которая соответствует нижнему мениску жидкости. В случае большой относительной плотности берут второй тип урометра. 2- определение рН мочи. На середину индикаторной бумаги наносят 1-2 капли исследуемой мочи и по изменению цвета одной из окрашенных полосок, совпадающему с окраской контрольной полосы, устанавливают Рн мочи. 3-цвет. В норме свежая моча имеет соломенно-желтый цвет.

60 определение наличия и количества в моче: белка, глюкозы, ацетона, билирубина. Белок в нормальной моче находится в виде следов, которые не открываются обычными реакциями. Но при ряде заболеваний с мочой начинают выделятьсязаметноеколич-во белков. Для обнаружения белка в моче применяют реакции осаждения с помощью азотной и сульфосалициловой кислот. ХОД: реакции проводится одновременно с исследованием нормальной мочи. К моче приливают 20% сульфосалициловую кислоту. При наличии белка в моче образуется белый осадок, количество которого зависит от конц белка в моче.

В норме в моче содер-ся 0,2-0,4 г/л глюкозы и она не обнаруживается обычными реакциями. Обычно повышение глюкозы в моче наблюдается при повышении концентрации сахара в крови. ХОД: во взятую натощак свеженабранную мочу погружают полоску глюкотеста та, чтобы желтая полоска, имеющаяся на полоске, была полностью смочена. Быстро извлекают бумажку из мочи, кладут смоченным концом на пластмассовую пластинку и выдерживают в таком положении около 2 мин. В случае присутствии глюкозы в моче желтая полоска окрашивается в различные цвета в зависимости от конц глюкозы.

ХОД: 1-Люголя на ацетон. К моче прибавляют р-р нитропрусида натрия и р-р гидроксида натрия появ-ся красно-бурое окрашивание. При подкислении конц уксусной кислотой окрашивание становится ярко-красным. 2- проба Либена на ацетон. К моче прибавляют р-р гидроксида натрия и затем по каплям р-р Люголя до слабо-желтой окраски р-ра. При наличии ацетона в моче жидкость мутнеет и обладает характерным запахом