![]()
Заглавная страница
Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь ![]() Мы поможем в написании ваших работ! КАТЕГОРИИ: ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Мы поможем в написании ваших работ! ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву ![]() Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Количественное определение гемоглобина в крови
Гемоглобинцианидным методом Задание 1.Определить содержание гемоглобина в крови гемоглобинцианидным методом. Принцип. Гемоглобин крови при взаимодействии с железосинеродистим калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин. Ход работы. К 5 мл трансформирующего раствора прибавляют 0,02 мл крови (разведение в 25 раз), хорошо перемешивают. Определение проводят через 10 мин против холостой пробы (трансформирующего раствора). Определяют оптическую плотность на спектрофотометре при 540 нм в 1 см кювете. Содержание гемоглобина (Х) в г/л рассчитывают по формуле: Х= D540 × 367,7. При фотометрировании определение проводят в диапазоне волн 500-560 нм (зеленый светофильтр). Эталонный раствор гемоглобина готовят так же, как и пробу цельной крови. Расчет содержания гемоглобина (В) в г/л проводят по формуле: В=(Dоп.×120)/Dэт., где Dоп. – оптическая плотность опытной пробы; Dэт. - оптическая плотность эталонной пробы; 120 - содержание гемоглобина в эталонном растворе (г/л). Клинико-диагностическое значение. В норме содержание гемоглобина в крови для мужчин составляет 130-160 г/л, для женщин – 120-140 г/л. Определение содержания гемоглобина – необходимый этап диагностики разных заболеваний. Повышение гемоглобина в крови может быть связано со следующими состояниями: 1) заболевания, при которых повышается уровень эритроцитов; 2) повышение кислородной ёмкости крови, вызванное гипоксией при сердечно-сосудистой патологии; проживании в высокогорных районах; ожирении, курении и образовании неактивного гемоглобина; 3) обезвоживание организма; 4) стресс и высокие физические нагрузки; 5) новообразования в почках, печени, ЦНС, яичниках; нарушение функции сосудов; 6) нарушение гормонального уровня (повышение кортикостероидов или андрогенов); 7) химические отравления угарным газом, нитратами или лекарствами; 8) ожоги. Снижение гемоглобина в крови может быть следствием: 1) кровотечений; 2) снижения уровня эритроцитов при разных видах анемий (дефицит витаминов В12 и В9; дефицит витамина С; нехватка железа; интоксикации или нарушение работы почек; нарушение созревания эритроцитов). Снижение гемоглобина могут вызывать разнообразные факторы: неполноценное питание; нарушение работы желудочно-кишечного тракта; употребление большого количества чая, кофе и других продуктов, тормозящих всасывание железа. ЛИТЕРАТУРА 1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 263-269, 419-423. 2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 317-323, 502-507. 3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 553-562. 4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 78-85, 503-506. 5. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 636-645. 6. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Коби-лянська Л.І. та ін./ За ред. О.Я. Склярова. – К.: Здоров’я, 2002. – С. 255-262. ЗАНЯТИЕ 6 Тема: Обмен гемоглобина; его распад. Биохимия жёлчных пигментов. Желтухи. Количественное определение билирубина и его фракций в сыворотке крови. Актуальность. Продолжительность жизни эритроцитов составляет около 120 суток, на протяжении которых они снашиваются и разрушаются; гемоглобин высвобождается и подлежит расщеплению на глобин и гем в селезёнке, костном мозге и купферовских клетках печени. Белковая часть подвергается обычным преобразованиям, присущим простым белкам. Молекула гема подвергается многоступенчатым преобразованиям, конечным продуктом которых является стеркобилин, который выводится с калом и мочой. При распаде гемоглобина образуются жёлчные пигменты (биливердин, билирубин и др). Билирубин вследствие слабой растворимости и токсичности транспортируется альбуминами крови и поступает на синусоидальную поверхность гепатоцитов путём облегчённого транспорта. В печени происходит конъюгация билирубина с глюкуроновой кислотой (УДФГК) под действием фермента УДФ-глюкуронилтрансферазы и преобразование в моно- и дибилирубинглюкурониды. Конъюгированный билирубин путём активного транспорта поступает в жёлчь и дальше в желудочно-кишечный тракт, где происходят его дальнейшие преобразования. Таким образом, существуют две формы билирубина: 1) неконъюгированный, свободный (билирубин-альбумин) и 2) конъюгированный, связанный (билирубинглюкурониды). По предложению Ван ден Берга первый приобрёл название «непрямого» (дает диазореакцию Эрлиха после предварительной обработки метанолом, кофеиновым реактивом), а второй - «прямого» (дает диазореакцию без предварительной обработки). Знание путей распада гемоглобина является важным для будущих врачей в связи с диагностированием разных заболеваний, дифференциальной диагностикой желтух, которые могут быть связаны с заболеваниями печени и ферментопатиями, а также с возможной коррекцией этих нарушений. Цель. Ознакомиться с ферментативным процессом распада гемоглобина в организме; жёлчными пигментами, которые образуются при этом, их преобразованием и значением исследования в крови, моче и кале. Особое внимание обратить на фракции билирубина и клинико-диагностическое значение их определения в сыворотке крови. Выучить нарушение обмена жёлчных пигментов и факторы, которые их вызывают. Уметь связывать знание теоретического материала с конкретными результатами лабораторных исследований и использовать их как критерии для установления вида той или иной желтухи. Ознакомиться с методом количественного определения общего билирубина и фракций в сыворотке крови и его клинико-диагностическим значением. ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ 1. Общая схема распада гемоглобина. 2. Жёлчные пигменты, их преобразование, значение исследования в крови, моче и кале. 3. Прямой и непрямой билирубин крови. Значение исследования. 4. Патобиохимия желтух: гемолитическая, паренхиматозная, обтурационная. 5. Ферментативные, наследственные желтухи: синдром Криглера-Найяра (“конъюгированная желтуха”), болезнь Жильбера (“абсорбционная желтуха”), синдром Дабина-Джонсона (“экскреционная желтуха”). 6. Ферментативные желтухи новорожденных, способы их предотвращения и лечения. ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ 1. Назовите реакции катаболизма гемоглобина, которые протекают в клетках ретикулоэндотелиальной системы.
2. Назовите реакции катаболизма гемоглобина, которые протекают в гепатоцитах.
3. Назовите реакцию катаболизма гемоглобина, которая протекает в кишечнике.
4. Какой из перечисленных жёлчных пигментов не выделяется с мочой?
5. У мужчины, 38 лет, с желтушной кожей отмечается анемия, увеличение селезёнки, гипербилирубинемия (билирубин непрямой), уробилинурия, гиперхоличный кал. Для какого состояния характерны эти изменения?
6. У новорожденного содержание билирубина повышено (за счет непрямого), кал интенсивно окрашен (повышено содержание стеркобилина), в моче билирубин не выявлен. О какой желтухе идёт речь?
7. У больного желтушность кожи, склер, слизистых оболочек. Моча цвета темного пива, кал гипохоличный. В крови повышено содержание билирубина как прямой, так и непрямой фракции, повышена активность АлАТ, ЛДГ4 и ЛДГ5. В моче определяется билирубин. О каком виде желтухи идёт речь?
8. У больного ребенка, 10 лет, выявлены тяжёлые неврологические нарушения, желтушность кожи, в сыворотке крови повышен уровень неконъюгированного билирубина. Вследствие нарушения синтеза какого фермента возникает болезнь Жильбера?
9. Пациент обратился в клинику с жалобами на общую слабость, боли в животе, плохой аппетит, наблюдаются признаки желтухи. В сыворотке крови содержание общего билирубина составляет 77,3 мкмоль/л, а конъюгированного - 70,76 мкмоль/л. Какой наиболее вероятный диагноз?
10. Укажите продукт распада гемоглобина в печени:
11. Укажите белок плазмы крови, который соединяется с гемоглобином при гемолизе эритроцитов:
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА |
|||||||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-04-08; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.235.108.188 (0.009 с.) |