Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Выявление сенсибилизирующей способности
Содержащиеся в ПКП высокомолекулярные соединения при контакте с кожей и слизистыми обычно не представляют реальной аллергоопасности. Однако многие низкомолекулярные соединения и ингредиенты в косметических средствах (особенно красители, отдушки, стабилизаторы, консерванты) способны к трансдермальному проникновению и образованию (за счет активных химических детерминант) конъюгатов с аутобелками организма, что может индуцировать гиперчувствительность замедленного и (или) немедленного типов к этим веществам и содержащим их ПКП. Поэтому исследования сенсибилизирующей способности являются обязательным этапом определения гигиенической безопасности ПКП и прогнозирования аллергоопасности ПКП при контакте с кожными покровами. Применимы два метода испытаний — по вариантам А и Б. Индекс сенсибилизирующей способности по варианту А Вариант А — экспериментальный, выполняют на морских свинках при многократных эпикутанных аппликациях испытуемого образца ПКП на фоне неспецифической иммуностимуляции организма. Данный вариант испытания позволяет в одном эксперименте адекватно оценить раздражающее действие на кожу и определить контактную сенсибилизирующую способность ПКП, в т. ч. окрашивающих кожу. Эпикутанные сенсибилизирующие аппликации испытуемым образцом ПКП проводят многократно в течение 5 дней на опытной группе из не менее чем 8 морских свинок, животным контрольной группы аналогично наносят дистиллированную воду. Условия и требования к подготовке и проведению испытаний, оценке результатов раздражающего действия такие же, как при установлении индекса кожно-раздражающего действия. За сутки до первой аппликации в апоневроз всех четырех лап животных опытной и контрольной групп после обработки места инъекции этиловым спиртом вводят 0,01 см3 полного адъюванта Фрейнда. Через 24 ч после последней аппликации испытуемым образцом ПКП определяют его сенсибилизирующую способность провокационным тестом опухания уха (ТОУ). Животным обеих групп испытуемые образцы ПКП в дозе по 0,025 см3 жидких, 0,05 см3 50 %-ных водных растворов и суспензий твердой консистенции или 0,025 г вязких продуктов равномерно наносят на внутреннюю и наружную поверхности кожи площадью 1 см2 срединного сегмента расправленного и фиксированного пальцами рук уха.
Степень опухания определяют по разнице толщины уха, измеряемой микрометром до и через 24 ч после тестирования у каждого животного обеих групп. Показатели ТОУ вычисляют сначала для каждого животного в отдельности по разнице в толщине уха до и через 24 ч после тестирования (Хk1, Хk 2, …, Хk n, Хо 1, Хо 2, …, Хо n), затем — среднегрупповые (для опытной и контрольной групп) по формуле: или , где Хk или Хо — среднегрупповые показатели ТОУ (в мм) в контрольной или опытной группах животных; k или о — контрольная или опытная группы животных; Т24 — толщина уха в мм через 24 ч после тестирования; Тф — толщина уха в мм до тестирования (фоновая); 1, 2, …, n — порядковый номер животного в каждой группе; n — количество животных в каждой группе. За результат испытания принимают статистическую достоверность различий показателей ТОУ опытной и контрольной групп по критерию Стьюдента. Сенсибилизирующая способность у испытуемого образца отсутствует (Is. = Нормированное отклонение t рассчитывается по формуле: , где Хk или Хо — среднегрупповые показатели ТОУ (в мм) в контрольной или опытной группах животных; SXo — Xk — средняя ошибка разницы между средними среднегрупповыми показателями ТОУ контрольной и опытной групп животных. Среднюю ошибку разницы при сравнении двух групп с малым числом результатов наблюдений (n) определяют по формуле: , где: числитель — объединенная сумма квадратов отклонений отдельных значений результатов измерений от среднегрупповых показателей ТОУ соответствующей опытной или контрольной группы; знаменатель — сумма чисел степеней свободы обеих сравниваемых групп; no и nk — количество животных в опытной и контрольной группах животных. Испытуемый образец ПКП обладает сенсибилизирующей способностью разной степени интенсивности (слабой, умеренной или выраженной), а индекс сенсибилизирующей способности по варианту А оценивают равным соответственно 1, 2, 3 (Is. = 1 балл, Is. = 2 балла, Is. = 3 балла соответственно) при статистически достоверном превышении показателя ТОУ в опыте над таковым в контроле — рассчитанная величина равна или больше значения коэффициента Стьюдента, соответствующего уровню доверительной вероятности р = 0,95;
Пример расчета. При постановке исследований по выявлению возможных сенсибилизирующих свойств (по варианту А) у краски для волос «Х» на двух группах животных, состоящих из 8 морских свинок, были получены следующие результаты теста опухания уха (табл. 7): Таблица 7
Рассчитать индекс сенсибилизирующей способности по варианту А. Решение. Для расчета индекса сенсибилизирующей способности необходимо рассчитать показатель ТОУ (разницу в толщине уха до и через 24 ч после тестирования) для каждого животного (Хi) и среднегрупповые (для опытной (Хо) и контрольной (Хk) групп), среднюю ошибку разницы обеих подопытных групп SXo — Xk и нормирование отклонение t (табл. 8). Таблица 8
. . . . Сравнивается полученное значение нормированного отклонения t (2,38) со значениями коэффициента t, согласно приложению, при степенях свободы n = 15 (8 + 8 – 1) при Индекс сенсибилизирующей способности по варианту Б Метод выявления сенсибилизирующей способности ПКП по варианту Исследования начинают с подготовки 4-слойных марлевых тампонов размером 1 ´ 1 см, накладок из полиэтиленовой пленки размером 2 ´ 2 см. Затем готовят дозы испытуемых ПКП: вязкой консистенции — по 0,05 г; твердой консистенции — 0,05 г разводят дистиллированной водой в 2 раза до получения 50 %-ных растворов, эмульсий, суспензий; из спиртосодержащих продуктов готовят двукратные (1:1), а из моющих средств — десятикратные (1:9) водные разведения. Приготовленные растворы или жидкие ПКП наносят в дозе по
Первичную аппликационную пробу выполняют наложением на кожу внутренней поверхности предплечья или плеча волонтера после обработки места аппликации 20 %-ным этиловым спиртом марлевого тампона с дозой испытуемого вещества так, чтобы полиэтиленовой подкладкой полностью прикрыть тампон, а саму подкладку фиксируют полосками лейкопластыря или бинтованием. Контрольную пробу с дистиллированной водой выполняют аналогично опытной на участке кожи, отстоящем от опытного участка на 1 см. Через сутки первичную аппликацию снимают, смывают остатки вещества с кожи опытного и контрольного участков струей теплой водой с туалетным мылом или ватным тампоном с 20 %-ным этиловым спиртом и спустя 1 час регистрируют функциональное состояние кожи на месте аппликации (по эритематозной реакции). При возникновении у волонтера в период аппликационной экспозиции негативных клинических симптомов раздражения (ощущение зуда, жжения, болезненности) даже слабой (переносимой) интенсивности со стороны опытного участка кожи, пробу немедленно снимают. В этом случае, а также при определении на опытном участке кожи эритемы после первичной аппликации (при отсутствии таковой на контрольном), эту аппликацию у данного волонтера повторяют на другом участке кожи, снизив концентрацию испытуемого продукта в 2 раза. В случае появления в процессе и после завершения повторной первичной аппликации субъективных симптомов раздражения у данного волонтера, его исключают из дальнейших исследований. При регистрации негативных проявлений у двух и более лиц дальнейшие исследования не проводят и делают вывод о том, что данный образец обладает кожно-раздражающим действием (Icut. = 1 балл). В случае отсутствия субъективных симптомов и объективных признаков раздражения после первичной аппликации аналогично, рядом с предыдущей (на расстоянии не менее 2 см), проводят вторичную 24-часовую аппликацию с тем же образцом, а также контрольную пробу с дистиллированной водой (на месте первичной «контрольной» пробы). При возникновении хотя бы у одного добровольца в период проведения вторичной аппликации клинических симптомов (зуд, жжение, болезненность), опыт с испытуемым образцом прекращают и делают вывод о наличии у него сенсибилизирующих свойств, и Is. принимают равным 1 баллу.
Через 1 ч (после обработки), 24 и 48 ч после суточной вторичной аппликации одновременно на участках первичной и вторичной аппликаций испытуемого изделия и контрольной пробы визуально в соответствии с таблицей 9 регистрируют функциональное состояние кожных покровов (интенсивность эритематозной реакции, наличие первичных высыпаний), а также учитывают субъективные клинические симптомы (зуд, жжение, болезненность, их выраженность). Таблица 9
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2017-02-05; просмотров: 349; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.147.104.248 (0.038 с.) |