Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
К практическому занятию № 46Стр 1 из 5Следующая ⇒
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ № 46 ТЕМА: «Микробиологическая диагностика инфекций, вызываемых гемофилами». I План занятия 1. Закрепить знания по изучению таксономии, морфологии, методов лабораторной диагностики гемофилов. 2. Изучить правила забора, хранение и транспортировки биологического материала приинфекциях, вызываемых гемофилами. 4. Овладеть методикой и техникой бактериоскопического и бактериологического методов диагностики гемофилов. 5. Изучить методики и провести постановку тестов идентификации гемофилов. 6.Изучить экспресс – методы обнаружения капсульного антигена (латекс-агглютинация, коагглютинация со стафилококковым протеином А, реакция встречного иммуноэлектрофореза). II Самостоятельная работа Задание 1 Познакомьтесь с нормативной документацией, регламентирующей микробиологическую диагностику гемофилов: 1. Микробиологические методы исследования биологического материала. Инструкция от 13.03.2010г. Р № 075-0210. 2. Временные методические рекомендации по забору и транспортировке биологического материала на гемофильную инфекцию № 02 -19/ 1638 от 21.06.2007г., ГУ «ГОЦГЭ и ОЗ», Шерендо Я.М. 3. Приказ № 68/ 14-с от 13.02.2007г «О формировании системы эпидемиологического надзора за гемофильной инфекцией». Задание 2 Изучите правила забора, хранения и транспортировки исследуемого материала – кровь, спинномозговая жидкость, мокрота - по рекомендациям по забору материала на гемофильную инфекцию ГУ «ГОЦГЭ и ОЗ», Гродно, 2007(см. Приложение № 1). Задание 3 Изучите по таблицам морфологические свойства гемофилов, зарисуйте в дневник и подпишите (см. Приложение № 2).
Задание 4 Приготовьте питательные среды, используемые при выделении гемофилов: Кровяной агар Способ приготовления: к 100 мл расплавленного и охлажденного до 45°-500С С питательного агара, соблюдая правила асептики, добавте 5% (5 мл крови на 100 мл питательной среды) сердечно - мозгового экстракта или дефибринированной крови человека, разлейте в стерильные чашки Петри, предварительно подогретые в термостате. Шоколадный агар (с гретой кровью) Принцип. Прогревание крови способствует освобождению из эритроцитов факторов роста X (гемин) и V
(никотинамидадениндинуклеотид), необходимых для культивирования гемофилов. Способ приготовления: к 100 мл расплавленного и охлажденного до 80°С питательного агара добавте 10 мл дефибринированной крови человека, тщательно перемешайте, после чего помещайте в водяную баню и, постоянно встряхивая, держите при температуре 70°С- 80°С до тех пор, пока цвет агара не станет шоколадным (25-30 мин.), разлейте в стерильные чашки Петри. Шоколадный бульон Способ приготовления: к 180 мл питательного бульона добавте 18 мл крови (9 мл эритоцитной массы и 9 мл сыворотки крупного рогатого скота) и 9 мл дрожжевого экстракта, разлейте в стерильные пробирки. Задание 5 Изучите питательные среды, используемые для культивирования гемофилов (демонстрации сред), зарисуйте в дневник, опишите характер роста гемофилов на данных средах (см. Приложение № 3).
1 2 3 Характер роста на средах: 1.
2.
3. Задание 6 Проведите 1-й этап бактериологического исследования материала (мокроты) с целью выделения гемофилов. Задание 7 Изучите методики и проведите постановку тестов идентификации гемофилов. Биохимическая идентификация микроорганизмов рода Haemophilus (см. Приложение № 4). Алгоритм Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) Исследование сыворотки больного в реакции непрямой (пассивной) гемагглютинации позволяет существенно увеличить процент лабораторного подтверждения генерализованных форм менингококковой инфекции. Для получения достоверного результата обязательным условием является исследование сывороток крови больного в динамике, т.е. взятых в разные сроки заболевания (на 1-й и 10 - 12-й дни заболевания). Одной из модификаций микрометода является постановка РНГА в полистироловых пластинах с объемом лунок не менее 300 мл с использованием автоматических дозаторов на 0,5 и 1 мл. Необходимые реагенты: диагностикумы эритроцитарные менингококковые полисахаридные серогрупп А и С; исследуемая сыворотка, разведенная 1:5; забуференный физиологический раствор (ЗФР). Ход исследования: два ряда полистироловой пластины (для выявления антител к менингококкам серогрупп А и С) заполняют по 1 мл ЗФР, затем проводят двукратное титрование исследуемой сыворотки с разведения 1:5. В каждый ряд добавляют по 0,5 мл соответствующего диагностикума. Пластину встряхивают и помещают в термостат на 2,0 - 2,5 ч при 37 °С, после чего учитывают результаты. Обязательными контролями служит отсутствие спонтанной агглютинации диагностикума и исследуемой сыворотки. Для этого к 1мл диагностикума добавляют 0, 50 мл ЗФР, а к 1 мл сыворотки -0, 5 мл 1 %-х эритроцитов барана. Учет результатов РНГА проводят по четырехкрестной системе. Четырехкратное и более нарастание титра специфических антител в процессе болезни служит подтверждением диагноза.
Экспресс-метод – иммуноиндикация с помощью реакции иммунофлюоресценции со специфической сывороткой типа b (используют при диагностике менингитов).
Оценка ___________ Подпись преподавателя ______________ Приложение № 1 КРОВЬ Показания для проведения микробиологического исследования: · клиническая картина сепсиса; · лихорадочные состояния неустановленной этиологии; · подозрение на инфекционные заболевания. ЛИКВОР Показания для проведения микробиологического исследования: · все случаи предполагаемого менингита; · осложнения после черепно-мозговых травм, нейрохирургических операций. Взятие исследуемого материала: Ликвор получают путем люмбальной пункции, реже при пункции боковых желудочков мозга. Желательно взять материал сразу при поступлении больного в стационар, до начала лечения. Пункция и взятие материала проводятся с соблюдением всех правил асептики. Первую порцию ликвора берут в отдельную пробирку для проведения общего клинического исследования. Вторую порцию, предназначенную для бактериологического исследования, собирают в стерильную центрифужную пробирку в количестве 1-2 мл. Ликвор рекомендуется наливать в пробирку шприцем без иглы. Нельзя касаться руками краев канюли, иглы, пробирки, класть пробку на нестерильные поверхности! Образец должен быть немедленно доставлен в лабораторию. Если это невозможно, в течение нескольких часов материал сохраняют в термостате при 37оС или в термосе. Во время транспортировки ликвор необходимо оберегать от охлаждения и перегревания, так как в противном случае некоторые микроорганизмы могут погибнуть. Для транспортировки используют изотермические емкости, грелки с теплой водой и т.д.
Приложение № 2
Семейство Pasteurellaceae, род Haemophilus. Некислотоустойчивые факультативно-анаэробные облигатные паразиты, для роста которых необходимы ростовые факторы XY, содержащиеся в эритроцитах. Мелкие неподвижные полиморфные бактерии (кокковидная или палочковидная форма), грамотрицательные. Спор не образуют, отдельные виды формируют капсулу.
Приложение № 3
Приложение № 4 Приложение № 5
Таблицы: «Интерпретация диаметров зон задержки роста при определении чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом диск-диффузии» гемофильной палочки.
Примечание: резистентный – устойчивый, умеренно резистентный – промежуточный. МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ № 46
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2017-02-07; просмотров: 183; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 18.117.188.64 (0.013 с.) |