Ответ построить в виде схемы, включающей этапы переваривания и всасывания жира, указания на локализацию процесса.

ЗАНЯТИЕ 15. «Лабораторный контроль состояния обмена липидов»

Цель занятия. Изучить механизмы мобилизации, распада и синтеза триацилглицеридов в жировой ткани, пути образования и использования ацетил-КоА, а также регуляцию этих процессов. Научиться использовать эти знания для объяснения энергетической функции липидов, понимания патогенеза некоторых форм ожирения; связывать обмен липидов с углеводным обменом и объяснить причины кетонемии и кетонурии при некоторых физиологических состояниях. Освоить технику расчета энергетического эффекта окисления три­ацилглицеридов. Овладеть количественным методом определения ЛПНП и понимать клинико-диагностическое значение результатов.

 

Студент должен знать:

1. Механизм тканевого липолиза: определение, химизм процесса, гормонозависимый фермент, конечные продукты, гормональную регуляцию мобилизации жира.

2. Структуру, состав и функции бурой жировой ткани

3. Сравнение гликогена и жира как запасаемых энергоносителей.

4. Как инициируется перекисное окисление ненасыщенных жирных кислот.

5. Химизм олкисления глицерина до конечных продуктов, энергетический эффект процесса.

6. Химизм b-окисления жирных кислот, его локализацию, регуляцию и энергетический эффект.

7. Пути использования ацетил-КоА.

8. Химизм биосинтеза жирных кислот, связь процесса с окислением углеводов и регуляцию.

9. Химизм депонирования жира, связь с окислением углеводов и регуляцию, особенности биосинтеза жира в различных тканях, тип липопротеидов, транспортирующих жир из органа.

10. Механизм и локализацию образования кетоновых тел, регуляцию и биологическое значение.

11. Возможные причины кетоза (кетонемии и кетонурии), связь его с обменом углеводов.

12. Особенности резистентности и склонности к кетозу у детей.

 

Студент должен уметь:

1. Связывать процессы депонирования, мобилизации жира в тканях, синтез кетоновых тел с углеводным обменом.

2. Объяснить причину кетонемии при голодании, физической нагрузке и сахарном диабете.

3. Количественно определить липопротеины низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке крови и анализировать полученные результаты.

 

Сведения из базовых дисциплин, необходимые для изучения темы:

1. Реакции радикального замещения. Цепные процессы.

2. Реакции элиминирования (дегидрирования).

3. Морфологические особенности бурого жира.

 

Аудиторная работа:

Лабораторная работа ( количественное определение ЛПНП, обнаружение

кетоновых тел)

1. Количественное определение липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке крови имеет клинико-диагностическое значение, так как количество ЛПНП крови связано с гиперхолестеринемией, поскольку холестерол входит главным образом в состав этой фракции. Увеличение содержания ЛПНП (гиперлипопротеинемия IIа, IIб и III типов) наблюдается при атеросклеротическом поражении сосудов. Нормальное содержание ЛПНП в сыворотке крови: 3,5 –5,8 г/л

Принцип метода: в присутствии хлорида кальция гепарин избирательно осаждает ЛПНП. Интенсивность образующегося помутнения пропорциональна их содержанию.

Ход работы: в пробирке №1 (опыт) смешивают 2 мл 0,277 % раствора СаСl₂, 0,2 мл исследуемой сыворотки и 0,04 мл 1% раствора гепарина.

В пробирке №2 (контроль) смешивают 2 мл 0,277% раствора СаСl₂, 0,2 мл исследуемой сыворотки и 0,04 мл дистиллированной воды. Тщательно смешивают и через 4 минуты измеряют оптическую плотность помутневшей опытной и контрольной проб на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной оптического слоя 5 мм при красном светофильтре против воды. Расчет осуществляется по формуле А = (Е_о - Е_к) х 10, где

А – концентрация ЛПНП, г/л;

Е_о - экстинция опытной пробы;

Е_к - экстинкция контрольной пробы;

10 – коэффициент пересчета.

Оформите результаты в виде протокола. Сравните с нормой. Выскажите предположения о состоянии липидного обмена.

Обнаружение кетоновых тел.

Проба Ланге. В пробирку налить 2-3 мл мочи (сыворотки), 1 мл ледяной уксусной кислоты и 0,5 мл 5% раствора нитропруссида натрия, затем осторожно наслоить 2 мл раствора аммиака. Появление фиолетового кольца указывает на наличие кетоновых тел.

Обнаружение ацетоуксусной кислоты в моче. К 5 мл мочи прибавить по каплям 5% раствор хлорного железа – выпадает осадок. При наличии ацетоуксусной кислоты дальнейшее добавление хлорного железа ведет к появлению винно-красного окрашивания, постепенно бледнеющего при стоянии вследствие самопроизвольного декарбоксилирования ацетоуксусной кислоты.

В протоколе указать следующее: какие вещества относят к кетоновым телам; что является субстратом их образования; в какой продукт образуется при декарбоксилировании ацетоуксусной кислоты; назвать состояния, которые могут сопровождаться кетонемией и кетонурией; объяснить механизмы возникновения.

Дайте ответы или выберите правильный ответ из предложенных:

1. Какой из ферментов, катализирующих тканевой липолиз, является гормонозависимым: