Методика экспертного исследования по определению фторид-иона в трупном материале.

 

Использованы данные из МУ подготовленными в судебно-химическом отделе научно-исследовательского института судебной медицины МЗ СССР А.Н.Крыловой и А,Н Лаврешина изд. М 1977г.

 

 

1.Изолирование фторид-иона из органов. 5 г пробы мелко измельченной печени или другого органа помещают в колбу прибора для дистилляции, который состоит из парообразователя, перегонной колбы с воронкой, змеевикового холодильника и приемника. Все части прибора соеденены при помощи шлифов. Колбу с объектом исследования устанавливают на предварительно нагретую до температуры 180-200°С печаную баню, соединяют с холодильником и подключают к нагретому парообразователю. Через воронку в колбу добавляют 20 мл 57% хлорной кислоты, затем 20 мл 80% серной кислоты. Для качественного т количественного исследования собирают 180-190 мл дистиллята. Для проведения реакции травления стекла используют другую навеску органа и отгоняют 100 мл дистиллята.

Обнаружение фторид-иона.

К полученному дистилляту добавляют концентрированной соляной кислоты до рН 1. Через 10 минут, в случае образования мути, фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу емкостью 200мл и доводят до метки водой. 4мл дистиллята используют для проведения качественных реакций, а оставшийся объём для количественного определения.

2.1. 2мл дистиллята переносят в пробирку, добавляют по 0,1 мл раствора эриохромцианина R и раствора хлорокиси циркония.

Оценка результата. При наличии фторид-иона красная окраска комплекса разрушается, появляется желтая окраска индикатора (при содержании фторид-иона на границе чувствительности реакции появляется красно-оранжевое окрашивание).

2.2. 2мл дистиллята переносят в пробирку и добавляют 0,15 мл раствора комплекса цирконий-ализариновый красный S.

Оценка результата. При наличии фторид-иона комплекс красного цвета разрушается с образованием желтой окраски свободного индикатора.

2.3. 2мл дистиллята переносят в пробирку, добавляют 3 капли ацетатного буферного раствора, по 0,2 мл ализаринкомплексона и раствора нитрата лантата, 0,5 мл ацетона.

Оценка результата. При наличии фторид-иона через 30 минут образуется тройной комплекс с переходом окраски от красной до синей.

Для болшей наглядности окраску во всех случаях необходимо сравнивать с окраской, полученной при добавлении тех же реактивов к 2 мл воды, «холостой» опыт.

Оценка результатов. При отрицательном результате двух цветных реакций исследование прекращают, делается заключение об не обнаружении фторид-ионов.

При положительных результатах обязательно производят реакцию травления стекла и количественное определение фторид-иона.

 

2.4. Полученные из другой навески 100мл дистиллята фильтруют, добавляют к нему 0,2 г окисис магния и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 минут. Охлаждают до комнатной температуре и фильтруют через бумажный фильтр, полностью перенося на него осадок. Сушат фильтр при комнатной температуре и осадок количественно переносят в тигель (кварцевый или платиновый)^* диаметром 2-3 см и высотой 3,5-4,5 см. Добавляют 2 мл концентрированной серной кислоты и накрывают стеклом, покрыым лаком, на поверхность которого нанесена надпись острием иглы 9полноту снятия лака на месте надписи определяют под лупой или микроскопом). Тигель ставят в нагретую песчаную баню и нагревают при 190-200°С в течение 2 часов, охлождая стекло увлажненной ватой. Лак снимают спиртом или спирт-эфирной смесью.

Оценка результата. При наличии значительных количеств фторид иона наблюдают, травление стекла на месте нанесения надписи. При отсутствии заметного травления при рассмотрении в проходящем свете используют отраженный свет.

Для большей визуализации увлажняют стекло дыханием: при этом надо учитывать, что при неполном снятии лака со стекла и в отсутствии фторид-иона может выделяться нанесенная надпись. В этом случае необходимо тщательно протереть стекло спиртом; при отсутствии фторид-иона надпись стирается.

Граница обнаружения фторид-иона в печени, почках, легких, желудке и кишечнике составляет цветными реакциями -0,4 мг в 100 граммах органа, реакцией травления стекла- 0,6 мг в 100 граммах органа.

 

Количественное определение.

3.1.Методика. 50 мл из 200мл дистиллята переносят в колбу, доводят раствором едкого натра рН до 7,0, добавляют 5 мл раствора эриохромцианина R, 5 мл раствора хлорокиси циркония и перемешивают. Оптическую плотность раствора измеряют при 527 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 30 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор комплекса циркония с эриохромцианина R и измеряют оптическую плотность его по отношению к исследуемому раствору (меняют местами кюветы при измерении плотности). Закон Бера соблюдается в пределах 0,12 мкг фторид-иона в 1 мл раствора.

3.2.Построение калибровочного графика. Калибровочный график по восходящей прямой строят по стандартному раствору фторида натрия в условиях анализа в пределах содержания 5,0-60 мкг фторид – иона в 50 мл раствора.

 

Формула расчёта: Х= а •V • 100 / V₁ • n • 1000

где: Х-количество фторид-иона в 100 г объекта, в мг;

а- количество фторид-иона в объеме дистиллята V_1, в мкг;

V-общий объем дистиллята, в мл;

V₁-объём дистиллята, взятый для определения, в мл;

n-навеска объекта, в граммах.

 

 

Граница обнаружения фторид-иона -0,2 мг в 100 граммах при отгоне 200 мл дистиллята. При содержании 0,5-10,0 мг фторид-иона в 100 г органа, разработанным методом, в среднем, определяется соответственно 88-92% с ошибкой 17,3-6,5. Данным методом определяется как естественное содержание количества фторид-иона, так и поступившие в организм при отравлениях различными соединениями фтора.

 

 

*При отсутствии указанных тиглей можно использовать новые, не использованные ранее форфоровые тигли того же размера, чувствительность реакции при этом уменьшается с 5 до 20 мкг фторид – иона.