Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Количественное определение нитритов в биологических объектах
Методом капиллярной газовой хроматографии. В пенициллиновый флакон вместимостью 15 мл помещали (раздельно) по 2,0г средней пробы крови, или измельченных тканей органов (печени, желудка, легких, почки, головного мозга, тонкого кишечника), добавляли по 0,5 мл 6%о раствора этилового спирта, закрывали герметично пробкой (фиксировали к горловине), добавляли по 0,5 мл насыщенного раствора щавелевой кислоты и выдерживали 2 минуты на водяной бане при температуре 800С. Газовую пробу из флакона микрошприцем, предварительно проверенным на отсутствие фонового газовыделения и предварительно подогретым до 40-50о С, отбирали для анализа по 100мкл. Условия газохроматографического разделения: газовый хроматограф c ПИД, колонка капиллярная кварцевая HP-1(ZB-1) с метилсилоксаном, размером 30,0м х 0,32мм. Температура колонки программируемая: 400С 6 минут, градиент 10град/мин, 1000С, 1 мин.,15 град/мин, 1800С,3 мин., затем кондиционирование и регенерация колонки 1 мин. при температуре 250оС. Газ-носитель - водород, скорость газа-носителя 6,8 мл/мин., поддувочный газ – азот (гелий). Режим с делением потока, отношение потоков 1:15, температура инжектора -2000С. Детектор - пламенно-ионизационный, 2500С, Расход водорода - 30 мл/мин, воздуха - 300мл/мин. Сигнал регистрировалcя и обрабатывался компьютерной системой (Данная методика разроботана с использованием программного обеспечения "Chem Station Version А10.02") и наработанным ранее методом. Параллельно вводили стандартную смесь спиртов, и, отдельно, калибровочную смесь этилнитрита (с концентрацией стандартного раствора нитрита натрия 1мг/мл); при этом идентифицированы пики метанола, этанола, н-пропанола, изо-пропанола, н-бутанола, изобутанола, н-амилового, изоамилового спиртов, этилнитрита. Записанный метод сохраняется в памяти компьютерной системы под определенным названием и может быть вызван в любое время. Исследование на «чистых растворах» показало, что по приведенной методике обнаруживается 3,6 мкг нитрита натрия в пробе (предел обнаружения), предел определения составляет 7,5 мкг. Методика экспертного исследования по определению фторид-иона в трупном материале.
Использованы данные из МУ подготовленными в судебно-химическом отделе научно-исследовательского института судебной медицины МЗ СССР А.Н.Крыловой и А,Н Лаврешина изд. М 1977г.
1.Изолирование фторид-иона из органов. 5 г пробы мелко измельченной печени или другого органа помещают в колбу прибора для дистилляции, который состоит из парообразователя, перегонной колбы с воронкой, змеевикового холодильника и приемника. Все части прибора соеденены при помощи шлифов. Колбу с объектом исследования устанавливают на предварительно нагретую до температуры 180-200°С печаную баню, соединяют с холодильником и подключают к нагретому парообразователю. Через воронку в колбу добавляют 20 мл 57% хлорной кислоты, затем 20 мл 80% серной кислоты. Для качественного т количественного исследования собирают 180-190 мл дистиллята. Для проведения реакции травления стекла используют другую навеску органа и отгоняют 100 мл дистиллята. Обнаружение фторид-иона. К полученному дистилляту добавляют концентрированной соляной кислоты до рН 1. Через 10 минут, в случае образования мути, фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу емкостью 200мл и доводят до метки водой. 4мл дистиллята используют для проведения качественных реакций, а оставшийся объём для количественного определения. 2.1. 2мл дистиллята переносят в пробирку, добавляют по 0,1 мл раствора эриохромцианина R и раствора хлорокиси циркония. Оценка результата. При наличии фторид-иона красная окраска комплекса разрушается, появляется желтая окраска индикатора (при содержании фторид-иона на границе чувствительности реакции появляется красно-оранжевое окрашивание). 2.2. 2мл дистиллята переносят в пробирку и добавляют 0,15 мл раствора комплекса цирконий-ализариновый красный S. Оценка результата. При наличии фторид-иона комплекс красного цвета разрушается с образованием желтой окраски свободного индикатора. 2.3. 2мл дистиллята переносят в пробирку, добавляют 3 капли ацетатного буферного раствора, по 0,2 мл ализаринкомплексона и раствора нитрата лантата, 0,5 мл ацетона. Оценка результата. При наличии фторид-иона через 30 минут образуется тройной комплекс с переходом окраски от красной до синей. Для болшей наглядности окраску во всех случаях необходимо сравнивать с окраской, полученной при добавлении тех же реактивов к 2 мл воды, «холостой» опыт.
Оценка результатов. При отрицательном результате двух цветных реакций исследование прекращают, делается заключение об не обнаружении фторид-ионов. При положительных результатах обязательно производят реакцию травления стекла и количественное определение фторид-иона.
2.4. Полученные из другой навески 100мл дистиллята фильтруют, добавляют к нему 0,2 г окисис магния и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 минут. Охлаждают до комнатной температуре и фильтруют через бумажный фильтр, полностью перенося на него осадок. Сушат фильтр при комнатной температуре и осадок количественно переносят в тигель (кварцевый или платиновый)* диаметром 2-3 см и высотой 3,5-4,5 см. Добавляют 2 мл концентрированной серной кислоты и накрывают стеклом, покрыым лаком, на поверхность которого нанесена надпись острием иглы 9полноту снятия лака на месте надписи определяют под лупой или микроскопом). Тигель ставят в нагретую песчаную баню и нагревают при 190-200°С в течение 2 часов, охлождая стекло увлажненной ватой. Лак снимают спиртом или спирт-эфирной смесью. Оценка результата. При наличии значительных количеств фторид иона наблюдают, травление стекла на месте нанесения надписи. При отсутствии заметного травления при рассмотрении в проходящем свете используют отраженный свет. Для большей визуализации увлажняют стекло дыханием: при этом надо учитывать, что при неполном снятии лака со стекла и в отсутствии фторид-иона может выделяться нанесенная надпись. В этом случае необходимо тщательно протереть стекло спиртом; при отсутствии фторид-иона надпись стирается. Граница обнаружения фторид-иона в печени, почках, легких, желудке и кишечнике составляет цветными реакциями -0,4 мг в 100 граммах органа, реакцией травления стекла- 0,6 мг в 100 граммах органа.
Количественное определение. 3.1.Методика. 50 мл из 200мл дистиллята переносят в колбу, доводят раствором едкого натра рН до 7,0, добавляют 5 мл раствора эриохромцианина R, 5 мл раствора хлорокиси циркония и перемешивают. Оптическую плотность раствора измеряют при 527 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 30 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор комплекса циркония с эриохромцианина R и измеряют оптическую плотность его по отношению к исследуемому раствору (меняют местами кюветы при измерении плотности). Закон Бера соблюдается в пределах 0,12 мкг фторид-иона в 1 мл раствора. 3.2.Построение калибровочного графика. Калибровочный график по восходящей прямой строят по стандартному раствору фторида натрия в условиях анализа в пределах содержания 5,0-60 мкг фторид – иона в 50 мл раствора.
Формула расчёта: Х= а •V • 100 / V1 • n • 1000 где: Х-количество фторид-иона в 100 г объекта, в мг; а- количество фторид-иона в объеме дистиллята V1, в мкг; V-общий объем дистиллята, в мл; V1-объём дистиллята, взятый для определения, в мл; n-навеска объекта, в граммах.
Граница обнаружения фторид-иона -0,2 мг в 100 граммах при отгоне 200 мл дистиллята. При содержании 0,5-10,0 мг фторид-иона в 100 г органа, разработанным методом, в среднем, определяется соответственно 88-92% с ошибкой 17,3-6,5. Данным методом определяется как естественное содержание количества фторид-иона, так и поступившие в организм при отравлениях различными соединениями фтора.
*При отсутствии указанных тиглей можно использовать новые, не использованные ранее форфоровые тигли того же размера, чувствительность реакции при этом уменьшается с 5 до 20 мкг фторид – иона.
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-12-30; просмотров: 354; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 18.118.9.146 (0.011 с.) |