Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Количественное определение гемоглобина в крови
Гемоглобинцианидным методом Задание 1. Определить содержание гемоглобина в крови гемоглобинцианидным методом. Принцип. Гемоглобин крови при взаимодействии с железосинеродистим калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин. Ход работы. К 5 мл трансформирующего раствора прибавляют 0,02 мл крови (разведение в 25 раз), хорошо перемешивают. Определение проводят через 10 мин против холостой пробы (трансформирующего раствора). Определяют оптическую плотность на спектрофотометре при 540 нм в 1 см кювете. Содержание гемоглобина (Х) в г/л рассчитывают по формуле: Х= D540 × 367,7. При фотометрировании определение проводят в диапазоне волн 500-560 нм (зеленый светофильтр). Эталонный раствор гемоглобина готовят так же, как и пробу цельной крови. Расчет содержания гемоглобина (В) в г/л проводят по формуле: В=(Dоп.×120)/Dэт., где Dоп. – оптическая плотность опытной пробы; Dэт. - оптическая плотность эталонной пробы; 120 - содержание гемоглобина в эталонном растворе (г/л). Клинико-диагностическое значение. В норме содержание гемоглобина в крови для мужчин составляет 130-160 г/л, для женщин – 120-140 г/л. Определение содержания гемоглобина – необходимый этап диагностики разных заболеваний. Повышение гемоглобина в крови может быть связано со следующими состояниями: 1) заболевания, при которых повышается уровень эритроцитов; 2) повышение кислородной ёмкости крови, вызванное гипоксией при сердечно-сосудистой патологии; проживании в высокогорных районах; ожирении, курении и образовании неактивного гемоглобина; 3) обезвоживание организма; 4) стресс и высокие физические нагрузки; 5) новообразования в почках, печени, ЦНС, яичниках; нарушение функции сосудов; 6) нарушение гормонального уровня (повышение кортикостероидов или андрогенов); 7) химические отравления угарным газом, нитратами или лекарствами; 8) ожоги. Снижение гемоглобина в крови может быть следствием: 1) кровотечений; 2) снижения уровня эритроцитов при разных видах анемий (дефицит витаминов В12 и В9; дефицит витамина С; нехватка железа; интоксикации или нарушение работы почек; нарушение созревания эритроцитов). Снижение гемоглобина могут вызывать разнообразные факторы: неполноценное питание; нарушение работы желудочно-кишечного тракта; употребление большого количества чая, кофе и других продуктов, тормозящих всасывание железа.
ЛИТЕРАТУРА 1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 263-269, 419-423. 2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 317-323, 502-507. 3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 553-562. 4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 78-85, 503-506. 5. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 636-645. 6. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Коби-лянська Л.І. та ін./ За ред. О.Я. Склярова. – К.: Здоров’я, 2002. – С. 255-262. ЗАНЯТИЕ 6 Тема: Обмен гемоглобина; его распад. Биохимия жёлчных пигментов. Желтухи. Количественное определение билирубина и его фракций в сыворотке крови. Актуальность. Продолжительность жизни эритроцитов составляет около 120 суток, на протяжении которых они снашиваются и разрушаются; гемоглобин высвобождается и подлежит расщеплению на глобин и гем в селезёнке, костном мозге и купферовских клетках печени. Белковая часть подвергается обычным преобразованиям, присущим простым белкам. Молекула гема подвергается многоступенчатым преобразованиям, конечным продуктом которых является стеркобилин, который выводится с калом и мочой. При распаде гемоглобина образуются жёлчные пигменты (биливердин, билирубин и др). Билирубин вследствие слабой растворимости и токсичности транспортируется альбуминами крови и поступает на синусоидальную поверхность гепатоцитов путём облегчённого транспорта. В печени происходит конъюгация билирубина с глюкуроновой кислотой (УДФГК) под действием фермента УДФ-глюкуронилтрансферазы и преобразование в моно- и дибилирубинглюкурониды. Конъюгированный билирубин путём активного транспорта поступает в жёлчь и дальше в желудочно-кишечный тракт, где происходят его дальнейшие преобразования. Таким образом, существуют две формы билирубина: 1) неконъюгированный, свободный (билирубин-альбумин) и 2) конъюгированный, связанный (билирубинглюкурониды). По предложению Ван ден Берга первый приобрёл название «непрямого» (дает диазореакцию Эрлиха после предварительной обработки метанолом, кофеиновым реактивом), а второй - «прямого» (дает диазореакцию без предварительной обработки). Знание путей распада гемоглобина является важным для будущих врачей в связи с диагностированием разных заболеваний, дифференциальной диагностикой желтух, которые могут быть связаны с заболеваниями печени и ферментопатиями, а также с возможной коррекцией этих нарушений.
Цель. Ознакомиться с ферментативным процессом распада гемоглобина в организме; жёлчными пигментами, которые образуются при этом, их преобразованием и значением исследования в крови, моче и кале. Особое внимание обратить на фракции билирубина и клинико-диагностическое значение их определения в сыворотке крови. Выучить нарушение обмена жёлчных пигментов и факторы, которые их вызывают. Уметь связывать знание теоретического материала с конкретными результатами лабораторных исследований и использовать их как критерии для установления вида той или иной желтухи. Ознакомиться с методом количественного определения общего билирубина и фракций в сыворотке крови и его клинико-диагностическим значением. ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ 1. Общая схема распада гемоглобина. 2. Жёлчные пигменты, их преобразование, значение исследования в крови, моче и кале. 3. Прямой и непрямой билирубин крови. Значение исследования. 4. Патобиохимия желтух: гемолитическая, паренхиматозная, обтурационная. 5. Ферментативные, наследственные желтухи: синдром Криглера-Найяра (“конъюгированная желтуха”), болезнь Жильбера (“абсорбционная желтуха”), синдром Дабина-Джонсона (“экскреционная желтуха”). 6. Ферментативные желтухи новорожденных, способы их предотвращения и лечения. ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ 1. Назовите реакции катаболизма гемоглобина, которые протекают в клетках ретикулоэндотелиальной системы.
2. Назовите реакции катаболизма гемоглобина, которые протекают в гепатоцитах.
3. Назовите реакцию катаболизма гемоглобина, которая протекает в кишечнике.
4. Какой из перечисленных жёлчных пигментов не выделяется с мочой?
5. У мужчины, 38 лет, с желтушной кожей отмечается анемия, увеличение селезёнки, гипербилирубинемия (билирубин непрямой), уробилинурия, гиперхоличный кал. Для какого состояния характерны эти изменения?
6. У новорожденного содержание билирубина повышено (за счет непрямого), кал интенсивно окрашен (повышено содержание стеркобилина), в моче билирубин не выявлен. О какой желтухе идёт речь?
7. У больного желтушность кожи, склер, слизистых оболочек. Моча цвета темного пива, кал гипохоличный. В крови повышено содержание билирубина как прямой, так и непрямой фракции, повышена активность АлАТ, ЛДГ4 и ЛДГ5. В моче определяется билирубин. О каком виде желтухи идёт речь?
8. У больного ребенка, 10 лет, выявлены тяжёлые неврологические нарушения, желтушность кожи, в сыворотке крови повышен уровень неконъюгированного билирубина. Вследствие нарушения синтеза какого фермента возникает болезнь Жильбера?
9. Пациент обратился в клинику с жалобами на общую слабость, боли в животе, плохой аппетит, наблюдаются признаки желтухи. В сыворотке крови содержание общего билирубина составляет 77,3 мкмоль/л, а конъюгированного - 70,76 мкмоль/л. Какой наиболее вероятный диагноз?
10. Укажите продукт распада гемоглобина в печени:
11. Укажите белок плазмы крови, который соединяется с гемоглобином при гемолизе эритроцитов:
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-04-08; просмотров: 942; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.209.81.51 (0.01 с.) |