Количественное определение антраценгликозидов.

Аналитическую пробу сырья измельчают и просеивают через сито с отверстиями диаметром в 1 мм. Точную навеску сырья 0,05 г помещают в колбу на 100 мл, прибавляют 1, 5 мл ледяной уксусной кислоты и смесь нагревают на водяной бане с обратным холодильником. Затем колбу охлаждают: через холодильник (ставят на него маленькую воронку) добавляют 30 мл хлороформа и кипятят на водяной бане 15 минут, после чего охлаждают и фильтруют через вату в делительную воронку емкостью 300 мл и вату промывают 10 мл хлороформа. Вату переносят обратно в колбу, прибавляют 15 мл хлороформа и кипятят с обратным холодильником 10 минут. Охлаждают и фильтруют через вату в ту же делительную воронку (где первый экстракт). Колбу дважды споласкивают хлороформом по 5 мл и фильтруют через эту же вату. К объединенным извлечениям медленно по стенкам делительной воронки прибавляют 100 мл щелочно – аммиачного раствора (5% раствора едкого натра, содержащего 2% раствор аммиака) и осторожно взбалтывают 5-7 минут, охлаждая воронку под холодной проточной водой.

После расслоения жидкости в делительной воронке прозрачный окрашенный верхний слой, не фильтруя, помещают в мерную колбу на 250 мл, а нижний хлороформный слой – обрабатывают 20 мл щелочно – аммиачного раствора до прекращения окрашивания жидкости (полное извлечени антраценпроизводных). Сливают окрашенные извлечения в ту же мерную колбу и доводят объем щелочно – аммиачным раствором до метки 250 мл.

Из мерной колбы на 250 мл берут 25 мл и помещают в колбу на 100 мл. Закрывают обратным холодильником и нагревают на кипящей водяной бане 15 минут. Охлаждают и измеряют оптическую плотность на ФЭКе на зеленом светофильтре при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя в 10 мм, для сравнения используют щелочно – аммиачный раствор. Растворы интенсивной окраски разбавляют перед колориметрированием щелочно – аммиачным раствором, а коэффициент разбавления помещают как множитель в числитель формулы расчета.

Строится калибровочный график по растворам хлорида кобальта. Содержание антрацена вычислят по формуле: , где

С – содержание антраценпроизводных в 1 мл испытуемого раствора, найденное по калибровочному графику, m – масса сырья в процентах, W – влажность сырья в процентах. Расчеты производятся с точностью до второго знака.

Качественное и количественное определение дубильных веществ в лекарственном растительном сырье.

Понятие о дубильных веществах и классификация.

Дубильными веществами называются высокомолекулярные, генетически связанные между собой природные фенольные соединения, обладающие дубящими свойствами. Они являются производными пирогаллола, пирокатехина, флороглюцина и имеют молекулярную массу от 1000 до 20 000. Простые фенолы дубящее действие не оказывают, но вместе с фенолкарбоновыми кислотами сопутствуют дубильным веществам.

Классификация.

Существует несколько классификаций дубильных веществ. Одна из них, наиболее старая, но не потерявшая своего значения и в настоящее время, основана на способности дубильных веществ разлагаться при нагревании.

 

Разновидность дубильных веществ	Нагревание до 180-200°С	Действие раствором солей окисного железа
Пирогаллоловая группа	Выделяется пирогаллол	Черно-синее окрашивание
Пирокатехиновая группа	Выделяется пирокатехин	Черно-зеленое окрашивание

Качественное определение.

1) 1, 0 крупного порошка растительного сырья залить 100 мл кипящей воды и настаивать на водяной бане (кипящей) в течение 15 минут, затем профильтровать не охлаждая через бумажный фильтр.

2) К 2-3 мл фильтрата прибавить 3 – 5 капель 1% ого раствора хлорида железа или железоаммонийных квасцов. Образуется черно – синее окрашивание при наличии дубильных веществ гидролизуемой группы или черно – зеленое окрашиваниеь (дубильные вещества конденсированной группы), переходящие в осадки.

Количественное определение.

Около 2,0 (точная навеска) измельченного сырья, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в коническую колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят с обратным холодильником на плитке с закрытой спиралью в течение 30 минут при периодическом помешивании. Жидкость охлаждают до комнатной температуры и процеживают около 100 мл в мерную колбу вместимостью 200 –250 мл через вату так, чтобы частицы сырья не попали в колбу. Затем пипеткой отбирают 25 мл полученного извлечения и переносят в другую колбу вместимостью 750 мл, прибавляют 500 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном помешивании МЕДЛЕННО рпствором перманганата калия (0,-2 моль/л) до золотисто – желтого окрашивания, обусловленного образоанием изатина.

Параллельно проводят контрольный опыт. Берут 25 мл раствора индигосульфокислоты, добавляют 500 мл воды и медленно титруют раствором перманганата калия. (0Ю02 моль/л) до золотисто – желтого окрашивания. 1 мл раствора перманганата калия (0,02 моль /л) соответствует 0, 004157 г дубильных в-в в пересчете на танин. Содержание дубильных вкщкств (Х) в процентах (до второго знака 0,00%) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:

Y – объем раствора перманганата калия, израсходованного на титрование извлечения, в мл.

- объем раствора перманганата калия, израсходованного на титрование в контрольном опыте, в мл

0,004157 – количество дубильных веществ, соответствующее 1 мл раствора перманганата калия (0,02 моль/л) в пересчете на танин, в граммах, а – масса сырья в граммах

В – потеря в массе при высушивании сырья в %(влажность)

250 – объем извлечения в мл

25 – объем извлечения, взятого для титрования в мл.

Результаты расчетов сравнить с требованиями ГФ и записать вывод: соответствует/не соответствует исследуемое сырье требованиями ГФ ХI издания.