Тема: Механізм дії та специфічність ферментів. Швидкість ферментативних реакцій. Одиниці активності ферментів. 


Мы поможем в написании ваших работ!



ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?

Тема: Механізм дії та специфічність ферментів. Швидкість ферментативних реакцій. Одиниці активності ферментів.



Актуальність теми: Знання механізмів дії ферментів лежать в основі медичної ензимології. Здатність ферментів каталізувати одну специфічну реакцію є найбільш важливою їх властивістю. Завдяки цьому швидкості специфічних метаболічних процесів можуть регулюватись шляхом зміни каталітичної активності ферментів.

Навчальні цілі:

Знати: механізм дії ферментів і види специфічності, залежність швидкості ферментативних процесів від температури, рН середовища, концентрації ферменту і субстрату.

Вміти: провести дослідження специфічності дії амілази і сахарази, трактувати одержані дані.

Самостійна позааудиторна робота

В зошитах для протоколів:

а)малюйте графіки залежності активності ферментів від температури і рН середовища.

б) намалюйте енергетичну діаграму неферментативної і ферментативної хімічної реакцій, покажіть на ній енергію активації і зміну вільної енергії.

в) підготуйте вихідні дані для оформлення протоколу лабораторної роботи „Специфічність ферментів”.

Контрольні питання

  1. Вплив температури на активність ферментів.
  2. Вплив рН середовища на активність ферментів.
  3. Активний центр ферментів.
  4. Основи специфічності ферментів.
  5. Види специфічності: стереохімічна, абсолютна, відносна.
  6. Вплив ферментів на енергію активації та енергетичний бар’єр хімічних реакцій.
  7. Механізм дії ферментів.
  8. Суть загального кислотно-основного каталізу і його вклад у механізм дії ферментів.
  9. Кінетика ферментативних реакцій.
  10. Оптимальні умови для визначення активності ферментів.
  11. Методи визначення та вираження активності ферментів.

 

Самостійна аудиторна робота

1. Назвіть приклади специфічності ферментів:

а) абсолютна;

б) відносна;

в) стереохімічна;

2.Охарактеризувати стадії ферментативного каталізу і ефекти, які їх супроводжують:

а) приєднання субстрату до ферменту,

б) активація фермент-субстратного комплексу,

в) утворення продуктів реакції,

г) вивільнення продуктів реакції.

3. Намалюйте графіки залежності швидкості ферментативної реакції від концентрації ферменту і субстрату.

4.Виконати лабораторну роботу „Специфічність ферментів” і захистити протокол.

Принцип методу. Ферменти володіють специфічністю, оскільки здатні каталізувати тільки певні хімічні реакції. Ферменти специфічні у відношенні як типу реакцій, які вони каталізують, так і субстратів, на які вони діють.

Амілаза слини прискорює гідроліз тільки полісахаридів, не діючи на дисахариди. Мальтаза слини прискорює гідроліз дисахариду мальтози, який утворюється при гідролізі крохмалю, але немає ніякої дії на інший дисахарид - сахарозу. Сахароза не має вільної альдегідної групи, тому не дає реакції з реактивом Фелінга. Реакція може бути позитивною тільки в тому випадку, коли сахароза розщепиться на свої складові частини - глюкозу і фруктозу.

Хід роботи.

а) Специфічність дії амілази слини. В 2 пробірки наливають по 5 крапель слини, розведеної в 5 разів. В 1 пробірку добавляють 10 крапель 1% р-ну крохмалю, в 2 - 10 крапель 1% р-ну сахарози. Обидві пробірки на 10 хв. поміщають в термостат або водяну баню при температурі 38оС, після чого з вмістом їх проробляють р-цію з реактивом Фелінга (див. нижче).

б) Специфічність дії сахарази. 1 г дріжджів розтирають з 2-ма грамами скляного піску, приливають 97 мл води і 2 мл толуолу, розчин фільтрують. Беруть 2 пробірки і в кожну доливають по 5 крапель сахарази фільтрату дріжджів. В 1-у пробірку добавляють 10 крапель 1% р-ну крохмалю, в 2 - 10 крапель 0,5% або 1% р-ну сахарози. Обидві пробірки поміщають в термостат при температурі 38оС на 10 хв., після цього проробляють з вмістом кожної пробірки реакцію Фелінга: до 5 крапель досліджуваного розчину приливають 3 краплі реактиву Фелінга, нагрівають пробірку до кипіння і кип’ятять 1 хв. У випадку позитивної реакції на глюкозу спостерігається червоне забарвлення внаслідок утворення закису міді. Порівнюють дію амілази слини і сахарази фільтрату дріжджів на сахарозу.

Література

  1. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. Біохімія людини. Тернопіль: Укрмедкнига, 2001. – 736с.
  2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – 508с.
  3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини. Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – 744с.

Обговорено і затверджено на засіданні кафедри, протокол №1 від 28.08.2008р.

Зав. кафедрою проф. Ерстенюк А.М.

 

Заняття №4



Поделиться:


Последнее изменение этой страницы: 2017-02-17; просмотров: 435; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы!

infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 44.211.117.101 (0.003 с.)